发芽糙米糖蛋白结构表征及抗氧化性能分析
蒸馏水,1材料与方法,1材料与试剂,2主要仪器,3方法,2结果与分析,1发芽糙米粗糖蛋白的分离纯化结果,2发芽糙米纯化糖蛋白的结构分析结果,3GBRG的抗氧化作用研究,3结论
刘晓飞,侯 艳,马京求,程传兴,张 娜,卢淑雯(1黑龙江省农业科学院博士后科研工作站 哈尔滨 150086 2哈尔滨商业大学食品工程学院 哈尔滨 150028)
糖蛋白是由低聚糖链和蛋白质组成的复合蛋白,低聚糖链通常通过糖基化作用与蛋白质连接[1]。糖蛋白的主要生物学功能是细胞或分子的识别作用,参与生物体中各种生物学反应,糖蛋白在生物体中普遍存在,具有多种生物学功能,如抗氧化,抗肿瘤[2],降胆固醇[3]等。目前在临床上使用的重组蛋白药物大多是糖蛋白。随着糖蛋白生物学研究的不断深入,糖蛋白的潜在功能逐渐被发现,从蛋白质折叠、细胞信号、受体结合、免疫识别到调节生物半衰期,都可以追踪到糖蛋白[4]。
发芽糙米是将糙米置于合适的温度、湿度下萌发,直至具有一定的萌发长度,含有芽和胚乳。糙米的发芽过程实际上是提高其营养价值的过程[5]。糙米在萌发过程中,不仅现有的营养物质含量有所增加[6],而且萌发引起的内部化学变化也产生了新的营养物质,如γ-氨基丁酸等[7]。研究表明,糙米中糖蛋白含量在一定程度上会随着萌发时间的延长而增加,且抗氧化性也与萌发时间呈正相关[8]。目前,关于发芽糙米糖蛋白(Germinated brown rice glycoprotein,GBRG)的研究较少,人们对其物理、化学性质及其潜在的结构和生物功能知之甚少,GBRG 尚未得到充分利用。
本试验中采取超声辅助提取GBRG,用DEAE-Cellulose 52 阴离子柱交换层析法和Sephadex G-200 凝胶层析法进行分离纯化。采用高效液相色谱、红外光谱、圆二色性、1H-NMR 谱等方法进行结构分析,评估GBRG 中主要成分的抗氧化作用。本研究旨在拓宽天然糖蛋白来源,为水稻增产和产业链延伸做一些研究和探索。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
1.1.1 发芽糙米粗糖蛋白样品制备 供试粳稻为“龙粳”,用龚谷机去除稻子外壳得到糙米,按照文献[9]的方法将糙米发芽,并制备发芽糙米粗糖蛋白样品,冻干保存备用。
1.1.2 试剂 DEAE-Cellulose 52,日本Pharmacia集团;乙醇(100%)、氢氧化钠、氯化铁、过氧化氢溶液、浓硫酸、乙酸、硫酸铜、邻苯三酚、硫酸亚铁、盐酸、苯酚(分析纯),南京生物化学试剂研究中心;单糖标准品、糖蛋白标准品,Sigma-Aldrich(中国上海)。
1.2 主要仪器
L-8900 型全自动氨基酸分析仪,美国Sigma公司;Nicolet 380 型傅里叶变换红外光谱仪 ......
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