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编号:1621008
TLR4/NF-κB p65高表达对皮肤鳞状细胞癌增殖、侵袭和转移的影响
http://www.100md.com 2024年4月23日 中华养生保健 2024年第8期
实验组,1材料与方法,1材料来源,2细胞转染,3TLR4,NF-κBp65RNA表达检测,4MTT检测细胞增殖活性,5Transwell小室检测细胞侵袭和转移指数,6Westernblo
     刘 莉

    (宁夏医科大学总医院肿瘤研究所,宁夏 银川,750001)

    皮肤鳞状细胞癌简称皮肤鳞癌,属于恶性肿瘤,在国内外均较为常见。该疾病来源于皮肤的鳞状上皮组织,属于非黑色素瘤皮肤癌[1-2]。近些年,由于环境污染与人口老龄化的原因,皮肤癌的发病率也随之升高,有研究显示,在我国皮肤恶性肿瘤中,皮肤鳞状细胞癌的比例占到80.0%,且发病率仍在上升,对人类生命安全造成严重的威胁[3]。皮肤鳞癌的病因至今仍未明确,可能与紫外照射损伤、人乳头瘤病毒、免疫抑制、砷角化病、放射性皮炎、黏膜白斑、瘢痕和白化病等有关[4-5]。皮肤鳞癌的发生仅次于基底细胞癌,占非黑色素瘤皮肤癌的20%。与基底细胞癌不同,皮肤鳞癌具有高度的侵袭能力,因此容易发生转移和复发[6]。早期的皮肤鳞癌可以通过手术切除,但是对发生转移的皮肤鳞癌患者的长期预后效果很差,1年的生存率为50%,5年的生存率仅有5%,而对于复发的患者,5年的生存率也不到10%[7]。核因子KappaB(NF-κB)存在于人体内,属于重要的转录因子,在抑制肿瘤细胞增殖、促进细胞凋亡中发挥作用,NF-κBp65是常见的NF-κB类型[8]。近年来研究证明,在皮肤鳞状细胞癌中,NF-KBp65蛋白呈现出低表达状态,而且当病情加重时,其表达水平也随之降低[9]。Toll样受体4(Toll-like recepTor 4,TLR4)不仅可以识别胞外抗原,对胞内损伤相关因子也起到应答作用,进而促使细胞分泌炎性因子和干扰素[10]。本研究具体探讨与分析了TLR4/NF-κB p65高表达对皮肤鳞状细胞癌增殖、侵袭和转移的影响,以明确TLR4/NF-κB p65的作用机制,现报道如下。

    1 材料与方法

    1.1 材料来源

    研究时间为2020年2月—2023年2月,自武汉普诺赛生命科技有限公司购买人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株,细胞培养于含10.0%胎牛血清(生产企业:杭州四季青生物公司)、100 U/ml青霉素(生产企业:上海生物工程有限公司)、0.1 mg/ml链霉素(生产企业:上海生物工程有限公司)的DMEM低糖液体培养液(生产企业:美国InviTrogene公司)中,超表达载体-pc3.0-TLR4NF-κB p65与空载体pc3.0由本实验室保存,LipofecTamine 2 000购自美国InviTrogene公司。Transwell小室、MTT试剂盒、AnnexinV-FITC试剂盒都购自碧云天公司 ......

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