董晓巧，俞文华，杜 权，王 昊，杨定博，沈永锋，江 力，杜垣峰，朱 强

    免疫反应是蛛网膜下腔出血后继发性脑损伤病理生理机制的重要组成部分[1,2]。FTY720是一种新型的免疫抑制剂，对机体免疫应答具有双向调节作用，抑制免疫反应的同时并不破坏机体对病毒的免疫应答和免疫记忆能力[3～5]。FTY720已经在临床上用于治疗多发性硬化症及器官移植后的排斥反应[6,7]。FTY720腹腔注射可以抑制颅脑损伤大鼠中枢神经系统炎症反应，降低神经细胞凋亡，改善大鼠神经功能[8,9]。FTY720腹腔注射也可以抑制蛛网膜下腔出血大鼠脑炎症反应，改善大鼠认知功能[10]。迄今，鲜见揭示FTY720神经保护的剂量-药效关系相关报道。本研究使用不同剂量FTY720腹腔注射治疗大鼠蛛网膜下腔出血，观察其对脑损伤大鼠海马组织炎症反应和细胞凋亡及神经功能的影响，探讨FTY720神经保护作用的剂量-药效关系。

    1 材料与方法

    1.1 材料：健康Wistar大鼠(南京大学模式动物研究所，雄性，清洁级，实验动物生产许可证SCXK(苏)2005_0003，使用许可证SYXK(苏)2005_0004)；Morris水迷宫(型号：XR_XM101，安徽正华生物仪器设备有限公司)；FTY720(规格：25mg，批号：SML0700，美国Sigma公司)；酶标仪(型号：MK3，美国Thermo Scientific公司)；低温高速离心机(型号：BECKMAN，北京普瑞麦迪实验室技术有限公司)；荧光分光光度仪(型号：UV_1202，日本岛津公司)；肿瘤坏死因子_α酶联免疫吸附试剂盒(批号：MTA00B，美国R&D公司)，白介素_1β酶联免疫吸附试剂盒(批号：M6000B，美国R&D公司)，白介素_6酶联免疫吸附试剂盒(批号：MLB00C，美国R&D公司)。

    1.2 方法：将48只大鼠随机分成假手术组、模型组、小剂量组和大剂量组，每组12只。大鼠予50mg/kg戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，采用Roux等[11]建立的枕大池二次注血法制作蛛网膜下腔出血大鼠模型。假手术组和模型组大鼠予以1ml 0.9%氯化钠注射液腹腔注射，小剂量组和大剂量组大鼠模型形成前0.5h分别予以FTY720 1mg/kg和5mg/kg剂量腹腔注射。24h后，取各组6只大鼠以80mg/kg戊巴比妥钠腹腔注射深度麻醉，断头处死，分离海马组织，用于炎症和细胞凋亡相关指标的测定；各组其余6只大鼠用于神经功能的评估。大鼠模型形成后，假手术组大鼠死亡1只，模型组大鼠死亡3只，小剂量组大鼠死亡2只 ......