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编号:12062774
结核分支杆菌ESAT-6基因蛋白的表达
http://www.100md.com 2008年3月1日
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     [中图分类号]R825.2 [文献标识码]A [文章编号]1185-1672(2008)-08-0204-02

    摘要:目的 构建致病性结核分枝杆菌早期分泌性抗原靶(Early secretory antigenic target,FSAT-6)基因的pET原核表达载体,诱导表达并初步鉴定该蛋白。方法 设计特异性引物,用PCR方法从结核分枝杆菌标准株H37Rv基因组中扩增ESAT-6基因,产物通过双酶切克隆入pET-32a(+)质粒,经PCR、酶切、测序等方法鉴定后,转入大肠杆菌BL21菌体中IPTG诱导表达,并经镍柱纯化、Western-blotting鉴定。结果 所获得ESAT-6基因序列与GenBank公布的完全一致;表达融合蛋白分子量约25kDa,并能与特异性单抗结合,具有一定活性。

    关键词:结核分枝杆菌;早期分泌性抗原靶ESAT-6;载体构建;融合表达

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