缺氧诱导因子-1α对脂多糖所致心肌细胞线粒体功能损伤的影响(3)
1.8 COX亚单位1,2(COX-1,2)蛋白表达测定用TRI reagent提取各组细胞蛋白质。取蛋白质20 μg以10%SDS-PAGE电泳分离;半干电转移蛋白到PVDF膜,5%牛血清白蛋白封闭,加一抗羊抗COX-1(1∶ 500),羊抗COX-2(1∶ 500)及兔抗α-actin(1∶ 500)4℃孵育过夜。洗涤后加入二抗(HRP标记的羊抗兔IgG)室温孵育1 h。洗涤后,显色剂ECL曝光,显影,定影。以 -actin为内参照。对结果进行吸光度扫描分析,以ACOX-1/A -actin及ACOX-2/A-actin表示蛋白的相对表达量。
1.9 统计学方法
数据采用均数±标准差(x±s)表示,采用SPSS 13.0统计软件,多组间资料比较采用单因素方差分析(One-Way ANOVA)检验。以P<0.05为差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 心肌细胞MMP、COX活性及ATP的变化
与对照组相比,LPS显著抑制心肌细胞MMP、COX活性及ATP含量(P<0.05) ......
您现在查看是摘要页,全文长 4166 字符。