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编号:12351533
TNF—α通过PKCα信号通路诱导人系膜细胞IP3R1表达(1)
http://www.100md.com 2013年2月1日 《中华急诊医学杂志》 2013年第2期
     【摘要】目的 探讨肿瘤坏死因子(TNF)对人肾小球系膜细胞(HMCs)Ⅰ型1,4,5-三磷酸肌醇受体(IP3R1)蛋白和mRNA表达的影响及其分子机制,以期为肝肾综合征(HRS)肾小球滤过率下降的发生机制和防治思路提供理论依据。方法 用实时定量PCR和免疫印迹法检测TNF刺激HMCs 0、2、4、8、24 h的IP3R1mRNA和蛋白表达的情况。以TNF刺激HMCs 8 h为对照,应用D609,U73122,PP1,Safingol和Rottlerin预处理HMCs后,实时定量PCR法检测TNF对IP3R1mRNA表达的影响;以TNF刺激HMCs 24 h组为对照,免疫印迹法检测上述抑制剂预处理后,TNF对IP3R1蛋白表达的影响。此外,应用非放射性测活法检测0、4、8、24 h TNF对PKC的活化影响 ......
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