激活自噬减轻心肺复苏后Wistar大鼠脑损伤(1)

http://www.100md.com 2013年12月1日 中华急诊医学杂志2013年第12期

     【摘要】目的观察自噬(autophagy)在心肺复苏(CPR)后Wistar大鼠脑损伤中的作用。方法实验一：36只健康成年雄性Wistar大鼠通过体外交流电刺激诱发心室颤动(VF)， VF(0)前和ROSC后1、2、4、8、12 h取大脑皮层观察beclin-1 和LC3Ⅱ的表达。实验二：60只Wistar大鼠随机(随机数字法)分为对照组(control)、自噬激活剂雷帕霉素组(Rapamycine)和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤组(3-MA)。VF前1 h分别向腹腔内注入生理盐水或雷帕霉素1 mg/kg或3-甲基腺嘌呤30 mg/kg。ROSC后2、4 h取大脑皮层，用电镜和Western blot方法观察神经元自噬的激活，免疫荧光观察LC3 颗粒的形成；24、48、72 h进行NDS评分；72 h后取大脑皮层行HE染色和TUNEL染色计数顶叶皮层存活神经元细胞数和凋亡神经元细胞数。beclin-1、LC3Ⅱ 表达和神经元计数用单因素方差分析，NDS比较用秩合检验。结果实验一中28只Wistar大鼠复苏成功。ROSC后2、4 h自噬基因beclin-1和LC3Ⅱ的表达明显低于VF前(P<0.05)，而ROSC后8、12 h的表达与VF前差异无统计学意义 ......