1.2.5组织蛋白质提取以及Western blotting法检测蛋白表达将脑组织剪碎匀浆，裂解各组脑组织蛋白，变性后经12% SDS变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后，再转印至硝酸纤维膜；室温摇床封闭2 h，分别加入抗NF-κB p(1∶：500)、抗iNOS(1∶500)孵育4 ℃过夜，加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗鼠二抗(1∶1000)，室温摇床2 h，同时加入β-actin(1∶2000)，室温摇床2 h，洗膜，增强发光检测试剂(试剂A∶试剂B=1∶1)反应发光，曝光，显影，定影。Gel pro凝胶软件分析系统分析NF-κB p65蛋白、iNOS蛋白和内参 β-actin 累积光密度值。

    1.3统计学方法

    SPSS 16.0 软件行数据分析，计量资料以均数±标准差(x±s)表示，采用方差分析(ANOVA)(方差齐时，方差齐组间比较采用LSD-t检验，方差不齐采用Dunnett’ T3检验) ......