1.5.4 心肌细胞凋亡检测 取100 μL 的细胞悬液于5 mL流式管中，加入5 μL Annexin V/FITC和10 μL 的PI(20 μg/mL)，摇匀后于室温避光反应15 min，在反应管中加入500 μL Buffer液，待流式细胞仪分析。

    1.5.5 心肌线粒体膜电位检测 取1×106/mL单细胞悬液0.1 mL，加入罗丹明123 100 μL ，避光、室温孵育30 min，加入PBS10 mL洗涤一次，弃上清液，待流式细胞仪分析。

    1.5.6 心肌NF-κB p65 检测 取单细胞悬液1×106/mL 0.1 mL，加入兔抗鼠单克隆抗体NF-κB p65 100 μL，避光、室温孵育30 min，加入PBS10 mL洗涤一次，弃上清液，加入羊抗兔FITC-IgG二抗工作液100 μL ，避光、室温孵育30 min，加入PBS 10 mL离心同上，弃上清以除去未结合的荧光二抗，上机检测前加入PBS0.1 mL经500目铜网过滤后上机检测。在对蛋白免疫荧光标记物测定时，设一抗或二抗的本底对照和阴性对照 ......