血管老化相关内皮细胞衰老的机制研究
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【摘要】 目的 研究血管老化相关内皮细胞衰老的机制。方法 选择12h新生儿脐带，采用胶原酶、DMEM培养基等试剂对血管内皮细胞进行培养，然后采用显微镜和超薄切片机、流式细胞仪、显微镜等仪器进行鉴定分析。结果 在实验中加入TNF-α刺激的内皮细胞细胞衰老加快，刺激因子的细胞与正常细胞相比较，增值指数明显降低，差异有统计学意义。结论 TNF-α可以加速细胞衰老。
【关键词】 血管老化内皮细胞衰老TNF-α
【中图分类号】R339.3+8 ; R329.2+8【文献标识码】A【文章编号】1671-5160(2014)02-0015-01衰老是指随着年龄的增长，人的机体发生组织功能的退化过程。衰老的一个重要表现就是血管老化，血管衰老是一个错综缝扎的过程，包括组织、细胞、分子水平等复杂的变化过程。影响血管衰老的因素也是多种多样的，如生存环境、生活习惯，遗传因素等等。目前人类对于血管衰老的认识水平还处于低级阶段，因此相关方面的研究具有深远意义。
1资料与方法
1.1 材料和仪器
材料：12 h内新生儿脐带；DMEM培养基；胎牛血清；EDTA；DMSO；总一氧化氮检测试剂盒；细胞周期流式细胞分析试剂盒；细胞衰老特异性P -半乳糖苷酶检测试剂盒；端粒酶活性检测试剂盒；Wester Blot配胶试剂盒；脱脂奶粉；Pierce BCA Protein Assay Kit；根过氧化物酶标记(HRP)的山羊抗兔IgG；兔抗人Caveolin-1及eNOS单克隆抗体；蛋白质 Marker；兔抗人P -actin单克隆抗体；PVDF 膜；ECL发光液；富士医疗用X胶片胶片；PBS缓冲液；SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(2x,液体)；RIPA裂解液(液体)；Protease inhibitor cocktail tablets；细胞培养瓶；培养板[1]。
仪器：FEI Tecnai G212 型透射电子显微镜；倒置显微镜 ；流式细胞仪；离心机；Leica UCT 超薄切片机 ；恒温水浴箱；超净工作台；培养箱；恒温箱 ......
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