董 娜 ,于 进,李 寰 ,陶 凌 ,王海昌,胡 涛

    经皮冠状动脉介入治疗术(percutaneous coronary intervention,PCI)已成为治疗冠心病的主要手段,但术后的再狭窄(restenosis,RS)率高达20%～30%,严重影响了PCI术的疗效;尽管各国学者对此进行了大量基础及临床研究,但该问题仍未解决,已成为全球的研究热点[1]。近年来研究发现,血管内皮细胞(vascular endothelial cell,VEC)与RS的关系密切相关,PCI术后VEC损伤的程度决定了新生内膜的增厚程度,对RS的程度起着关键作用[2]。VEC损伤的原因很多,除了PCI术不可避免的机械损伤外,脂质过氧化是一个重要机制;PCI术后导致血管局部发生一系列复杂的病理生理变化,诱导还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷氧化酶,使血管局部生成过量的活性氧(reactive oxygen species,ROS),导致脂质过氧化,从而引起VEC的DNA损伤及细胞功能障碍[3,4]。因此,有效地阻断ROS对VEC的损伤作用,尽快恢复VEC活性,加速VEC的修复,是防治RS的重要途径之一。原花青素为黄酮类化合物,存在于葡萄、松针、苹果、高粱、樱桃等多种植物中,具有广泛的生物活性;近年来的研究发现其有抗氧化、抗肿瘤、抗炎、抗病毒、预防心血管疾病等作用[5]。有研究发现,原花青素对心脏缺血再灌注时产生的ROS具有浓度依赖性的抑制作用,可保护和修复由缺血再灌注造成的心肌细胞损伤[6]。但其是否能作为抗氧化剂阻断ROS对VEC的损伤尚未见报道。本研究通过应用不同浓度的过氧化氢(H2O2)作为外源性ROS作用于培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)造成其脂质过氧化损伤,观察了原花青素是否具有减轻VEC脂质过氧化损伤的作用。

    1 材料与方法

    1.1 材料和仪器 原花青素(成都康弘制药有限公司惠赠);过氧化氢(Sigma公司);3H-TdR(中科院上海原子能研究所);DNA-prep染色试剂(Coulter公司);DMEM干粉细胞培养基(Hyclone公司);流式细胞仪Elite ESP型(Coulter公司);CO2培养箱(Nuair公司);液体闪烁计数器 LS-6500(Beckmen公司);其他试剂均为进口分装或国产分析纯 ......