赵 军, 张传福, 张廷芬, 晏沐阳*, 宋宏彬*

    CD46在小鼠脑缺血再灌注损伤中的表达和意义

    赵 军1, 张传福2, 张廷芬2, 晏沐阳1*, 宋宏彬2*

    (1解放军总医院老年心血管病研究所, 北京 100853;2军事医学科学院疾病预防控制所, 北京 100071)

    观察补体调节蛋白CD46在小鼠脑缺血-再灌注损伤过程中的表达变化情况，探讨其在脑缺血-再灌注损伤中的可能意义。采用线栓法制备小鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型，缺血1h后再灌注。记录脑组织病理的动态变化，应用免疫荧光组织化学法及荧光定量PCR法检测脑内补体调节蛋白CD46的表达变化。脑组织病理损伤在再灌注后24h达最重，脑内补体调节蛋白CD46的表达水平逐渐减少，至再灌注后24h达最低，再灌注96h基本恢复正常。补体调节蛋白CD46表达水平与脑组织病理损伤呈负相关。脑缺血-再灌注后补体调节蛋白CD46的表达水平发生显著变化，推测其可能参与脑缺血-再灌注后的免疫损伤过程，通过调节补体调节蛋白CD46的激活可为治疗脑缺血-再灌注损伤提供参考。

    脑缺血; 再灌注损伤; 免疫损伤; 补体调节蛋白CD46

    缺血性脑血管病有着高发病率、高致残率和高病死率，严重危害人类健康。脑缺血再灌注损伤，即为大脑短时间缺血后，突然恢复血供时会引起一个强烈的炎症反应，导致脑组织继缺血损伤后再次损伤。研究认为，补体系统过度激活的炎症效应是脑内炎症反应的主要始动因素之一[1]。CD46是补体系统中重要的补体调节蛋白，正常情况下，CD46在补体级联反应中抑制补体活化，保护自身组织免受补体攻击。但其在脑缺血-再灌注损伤中的表达和意义并不清楚。我们通过建立小鼠脑缺血再灌注动物模型，应用免疫荧光组织化学法和荧光定量PCR技术，检测脑组织中不同时间点补体调节蛋白CD46的表达变化情况，初步探讨其在脑缺血再灌注免疫损伤中的可能意义。

    1 材料与方法

    1.1 动物及分组

    健康雄性昆明小鼠，体质量(23±3)g，由军事医学科学院实验动物中心提供。48只小鼠随机分为正常组、缺血再灌注6，24，48，72，96h，每组均为8只。

    1.2 脑缺血再灌注动物模型建立

    参考Longa等[2]的方法并做适当改变，制备小鼠脑缺血再灌注动物模型，用1%的戊巴比妥钠，按照50mg/kg腹腔注射麻醉，麻醉成功后，在小鼠颈部做正中切口，长度约为1cm，逐步分离小鼠右侧颈总动脉、颈外动脉，并结扎，在颈总动脉结扎部位远心端剪口 ......