杜氏盐藻RbcS基因cDNA片段的克隆和序列分析

http://www.100md.com 2005年4月1日 柴玉荣 陈华艳 王天云 侯卫红 袁保梅 王建民 薛乐勋

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     关键问 杜氏盐藻；1，5—二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶RbcS；简并引物

    中图分类号 Q781

    摘要 目的：克隆杜氏盐藻1，5—二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(RuBisCO)小亚基RbcS cDNA片段。方法：根据莱茵衣藻、团藻、玉米等真核生物的RuBisCO小亚基及RbcS氨基酸的高度保守序列ETRSYLPP和MNKLPMLFC，设计一对简并引物，采用RT—PCR方法及该简并引物克隆杜氏盐藻RbcS cDNA。PCR产物经T—A克隆与T—vector相连，转化大肠杆菌JMl09，随机挑取数个菌落，筛选鉴定，对阳性克隆进行测序分析。将测序结果推导成氨基酸序列进行同源性比较。结果：得到的cDNA长度为209 bP，编码69个氨基酸。推导的氨基酸序列与团藻、ChlorolllOllassp. ANT3、衣藻、伞藻、菠菜、玉米的RbcS相比较，同源性分别为85%、84%、82%、76%、70%、69%。结论：所克隆的序列为杜氏盐藻RbcS cDNA片段。

    http://www.100md.com/html/paper/1671-6825/2005/02/21.htm

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