人多肽：N-乙酰氨基半乳糖转移酶2基因反义RNA表达质粒的构建及克隆鉴定
 |
| 第1页 |
参见附件(307KB，4页)。
[摘 要]目的：研究反义封闭即ppGalNAc—T2基因表达对胃癌细胞GC7901细胞增殖以及肿瘤细胞生物学行为的影响，构建反义表达载体并转染胃癌细胞GC7901。方法：在对几种肿瘤细胞的ppGalNAc—T2基因的表达水平分析后，以高表达ppGalNAc—T2的人胃癌细胞GC7901的总RNA为模板，利用RT-PCR方法扩增两段不同长度ppGalNAc—T2基因片段，构建反义表达载体并转染胃癌细胞GC7901，通过G418筛选，建立一系列旨在封闭胃癌细胞GC7901细胞pp- GalNAc—T2基因表达的亚细胞克隆。通过荧光显微镜、RT-PCR技术手段检测封闭反义ppGalNAc—T2基因RNA表达。结果：ppGalNAc—T2反义表达质粒载体pEGFP-FDT2和pECFP-FXT2经限制性酶切及部分序列分析证明基因已正确插入载体中，荧光显微镜及RT-PCR显示转染成功。结论：成功构建了ppGalNAc—T2反义表达质粒载体，反义封闭pp- GalNAc—T2基因表达后，胃癌细胞GC7901ppGalNAc—T2的含量明显降低，为进一步研究ppGalNAc—T2奠定了基础。
[关键词] 多肽：N-乙酰氨基半乳糖转移酶；O—糖基化；GC7901细胞；RT-PCR；pEGPP-C1质粒
[中图分类号] R34
[文献标识码] A
[文章编号] 1671—7783(2005)02—0100—05
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(307KB，4页)。