伤寒沙门菌ｆｌｊＡ样基因缺陷变异株的制备

http://www.100md.com 2005年6月1日 徐顺高 马 洁 周丽萍 张驰宇 黄新祥

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     [摘 要] 目的：为探讨z66鞭毛抗原阳性伤寒沙门菌的卢fljA样基因的功能，制备沙门菌fljA样基因缺陷变异株。方法：根据伤寒沙门菌fljA样基因序列，设计PCR特异性引物并在5末端加接酶BglⅡ位点，扩增fljA样基因上、下游片段，用BgJⅡ消化后，定向连接成fljA样基因的缺损性同源性核苷酸片段，先克隆至pGEM-T质粒，再经BamHI酶切后导人自杀质粒pGMBl51，电转化人伤寒沙门菌(GIFU 10007)，进行同源重组。用PCR观察重组现象，将完全重组的菌株作为fljA样基因的缺陷孪异株，并通过相应的核苷酸序列分析加以确定。结果：PCR及序列分析证实，缺陷变异株的fljA样基因缺失231个碱基。结论：成功构建伤寒沙门菌fljA样基因缺陷变异株，为进一步研究其在伤寒沙门菌鞭毛抗原表达的调控作用奠定了基础。

    [关键词] 伤寒沙门菌；基因缺陷变异；fljA；同源重组

    [中图分类号] R373；R394-33

    [文献标识码] A

    [文章编号] 1671—7783(2005)03—0205—04

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