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编号:11111408
葡萄糖苷酶Ⅰ特异性siRNA—EGFP真核表达载体的构建及表达
http://www.100md.com 2005年4月1日 李冬青 章晓联 戚中田
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     摘要 目的:构建葡萄糖苷酶I(slucosidaseidaseⅠ,GluI)特异性siRNA真核表达载体。方法:根据siRNA靶序列选取原则,设计并合成针对鼠葡萄糖苷酶IcDNA的寡聚DNA,退火井连接至载体pSilencerl.0—U6,再将U6启动子及下游插入片断一起切下,克隆至真核表达载体p2GFP—C1.通过限制性酶切和测序对重组表达载体进行鉴定,最后将该质粒转染至HeLa细胞,共聚焦荧光显微镜观察其表达。结果:①限制性酶切和测序结果表明成功构建了带有EGFP基因的鼠GluI特异性的siRNA真核表达载体pC—lU6glu;②共聚焦荧光显微镜观察结果表明p—ClU6glu成功转染至HeLa细胞。结论:pC—lU6glu的成功构建及表达为进一步利用siRN八研究葡萄糖苷酶Ⅰ的功能和治疗肿瘤奠定基础。

    关键词 葡萄糖苷酶Ⅰ;siRNA;真核表达载体

    中图分类号 R 392.11 文献标识码 A 文章编号 167l—8852(2005)02—0190—04

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