抗结核ＤＣ疫苗的初步研究
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摘要 目的：研制抗结核的新型疫苗(DC疫苗)。方法：无菌分离C57BL/6小鼠骨髓细胞，以rGM—CSF及rlL—4诱导分化获得树突状细胞(DC)，以pEGHsp65融合质粒转染DC，共聚焦激光扫描显微镜检测转染率，继以电镜鉴定细胞形态、流式细胞术分析组合性表面分子表达、混合淋巴细胞反应(MLR)检测体外刺激T细胞增殖的功能。将制备的DC疫苗静脉接种正常同系小鼠，分别取各脏器冰冻切片后荧光显微镜观察；取小鼠静脉血用ELISA法检测TL—12及IFN—γ的表达量。结果：24 h DC转染率约20%，电镜可见细胞呈典型毛刺状突起，流式细胞分析表明转染后的DC表面MHCⅡ、33D1的表达量均呈显著增高。MLR显示，pEGHsp65转染DC组与pEG—FP—Cl转染DC组及空白DC组比较呈统计学增高。脏器冰冻切片显示，接种pEGHsp65转染DC小鼠组及pEG—FP—Cl转染DC小鼠组与未转染DC组比较，在各脏器分布中，以脾脏分布显著增高。其余脏器分布无显著差别。pEGHsp65转染DC小鼠组IL—12及IFN—γ表达量显著高于pEGFP-C1转染DC小鼠组及未转染DC小鼠组，PC0.05，未转染DC组与阴性对照组相比，IL—12及IFN—γ表达量也有统计学增高，P+1 文献标识码 A 文章编号 1671—8852(2005)06—0747—05
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