IkBα突变体的真核表达载体构建及表达

http://www.100md.com 2006年2月1日 祝恒成 陈江华 何 强 刘修恒

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     摘要 目的：构建NF—_kB的抑制蛋白I_kBα突变体(I_kBαM)的真核表达载体，检测其在内皮细胞中的表达。方法：从克隆质粒pSP64TL I_kBαM中用限制性内切酶双酶切I_kBαMcDNA片段，克隆到真核表达质粒pcDNA 3.1/myc-HisA内构建pcDNA.3.1/myc-HisA—I_kBαM质粒，并酶切鉴定及测序分析。以脂质体法转染内皮细胞，观察其表达及活性。结果：pcDNA 3.1/myc—HisA—I_kBαM质粒含有大小正确的I_kBαMcDNA碱基片段，其碱基序列为编码目的基因的正确序列。pcDNA 3.1/myc—His A—I_kBαM质粒能在内皮细胞中表达，并抑制IL—6分泌。结论：真核表达质粒pcDNA 3.1/myc—His A—I_kBαM构建成功，I_kBαM蛋白在内皮细胞中表达，并具有良好的生物学活性。

    关键词 I_kBα突变体；真核表达；基因克隆；内皮细胞

    中图分类号 Q785 文献标识码 A 文章编号 1671—8852(2006)01—0009—04

    http://www.100md.com/html/paper/1671-8852/2006/01/03.htm

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