冯鹏,孙治前,罗文珍,史正刚,李玉霞,吴丽萍,尚菁,田文霞,陈静

    (1.甘肃中医药大学中医临床学院,甘肃 兰州 730000;2.河西学院医学院,甘肃 张掖 734000;3.甘肃中医药大学附属医院,甘肃 兰州 730020)

    抽动秽语综合征(Tourette syndrome,TS)又称多发性抽动症,是发生在儿童时期以不自主的头面部、肢体和发声抽动为主要特征的常见神经精神疾病。TS因临床症状难以自控,给处于生长发育阶段的儿童在学习、生活和性格塑造等方面带来了深远的影响[1-2]。临床证据表明有2/3的TS患儿临床症状可经药物控制或缓解,但依然有近1/3的TS患儿症状波动可持续至成年,严重的患儿甚至出现自残行为[3]。如何有效控制儿童的抽动症状,并能长久地保持疗效,使患儿顺利融入学校、社会，已成为亟待解决的问题。中医药治疗TS临床疗效确切,得到了患儿家长的广泛认可[4-5]。

    本课题组长期从事TS的防治研究,通过多年临床实践总结,自拟菖蒲郁金汤治疗本病,疗效确切,可明显改善抽动症状、减少抽动损害[6-8]。在对菖蒲郁金汤干预TS模型大鼠的研究中发现,菖蒲郁金汤可通过调控多巴胺(Dopamine,DA)系统发挥抗抽动的效应,但菖蒲郁金汤是如何调控DA的具体机制尚不清楚。在课题组前期研究的基础上,以突触体为研究对象,进一步明确菖蒲郁金汤抗抽动的作用机制,拟从DA神经元突触前释放角度研究菖蒲郁金汤对SANRE蛋白复合体介导的突触囊泡释放DA的影响。

    1 材料

    1.1 动物

    SPF级健康SD大鼠240只,3周龄,体质量(60±10)g,雄性,由甘肃中医药大学动物实验中心提供,实验动物许可证号:SCXK(甘)2015-0002。所有动物饲养于甘肃中医药大学SPF级动物房,使用许可证号:SYXK(甘)2015-0005。本实验方案经过甘肃中医药大学实验动物伦理委员会审查,符合动物保护、动物福利和伦理原则,符合国家实验动物福利伦理相关规定,审查编号:2020-257。本实验实施过程中严格遵守动物使用的3R原则。

    1.2 药物及试剂

    硫必利,江苏恩华药业股份有限公司生产,批号:20191203,规格:100 mg,药品研磨后加生理盐水配制成3.194 mg·mL-1混合液;自拟菖蒲郁金汤(石菖蒲10 g,郁金10 g,僵蚕8 g,蝉蜕8 g,全蝎3 g,天麻8 g,远志8 g,天竺黄8 g,磁石20 g,石决明20 g,川牛膝10 g,焦山楂8 g)中药饮片由甘肃中医药大学附属医院中药房提供,处方药材煎煮制备工艺按课题组前期研究方案进行[7],浓缩药液至生药含量为5.152 g·mL-1 ......