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编号:238035
UFLC-MS/MS法分析蜈蚣中3种多肽成分以及在蜈蚣鉴别中的应用
http://www.100md.com 2022年10月18日 南京中医药大学学报 2022年第10期
药典,1材料,1仪器,2试剂,2方法,1色谱条件,2质谱条件,3对照品溶液的制备,4供试品溶液制备,3结果,1蜈蚣肽段的筛选,2质谱分析,3蜈蚣蛋白提取条件的考察,4线性关系考察,5样品测定以
     李彦超,胡靓君,张琪,刘睿,崔小兵,柴川,文红梅

    (南京中医药大学药学院,江苏 南京 210023)

    《中国药典》(以下简称“药典”)收载的蜈蚣为蜈蚣科少棘巨蜈蚣ScolopendrasubspinipesmutilansL.Koch的干燥体[1],性辛、温,有毒。其始载于《神农本草经》,被列为下品,具有息风镇痉,攻毒散结,通络止痛之功效。由于其性猛力强,疗效远超其他平性中药,被历代医家所喜用。

    我国蜈蚣资源种类较多,分布较广,目前药用蜈蚣多来源于野生,除药典规定的正品药用蜈蚣少棘巨蜈蚣外,还有多棘蜈蚣S.subspinipesmultidensNewport、墨江蜈蚣S.mojiangicaZhang et Chi、黑头蜈蚣S.negrocapitisZhang et Wang和哈氏蜈蚣S.hedaaniBrandat这4种常见品种,在某些地区的民间也作为药用蜈蚣使用,存在着混用误用现象[2]。不同品种蜈蚣在产地、形态及功效等方面存在差异。少棘巨蜈蚣主要分布在长江中下游地区,其头板及第一背板桔红色,其他背板深绿色,体型小,主治肝风内动,痉挛抽搐,小儿惊风,风湿顽痹,蛇虫咬伤等;多棘蜈蚣主要分布在云南、广西等地,头板及第一背板红褐色,其他背板棕色,体型大,内服或外用,用于惊风、抽搐、淋巴结核、肿毒疮疡、肿瘤等;墨江蜈蚣主要分布在云南墨江地区,暗褐色,体型小,内服,用于中风、风湿、疮疡、瘰疬等;黑头蜈蚣分布在长江流域,青绿色,体型小,有时混于少棘巨蜈蚣药材商品中;哈氏蜈蚣主要分布在珠江流域,云南、海南等地,头板及第一背板红棕色,其他背板棕色或黄棕色至红棕色,泡酒外用,用于风湿、癣疥等[3]。

    蜈蚣中蛋白质和多肽成分含量占60%~70%[4],为抗肿瘤[5-7]、抗凝、溶栓[8-9]和抗菌[10-13]等作用的有效成分,但由于蛋白多肽类成分复杂,缺乏针对蜈蚣蛋白多肽类成分的特异性鉴别。基于生物质谱的分析方法已被应用于不同物种的鉴别,如梁瑞强等[14]找到全蝎的特征多肽(IIAPPER),可用于区分全蝎与其他品种动物。2020年版药典采用液质联用法选取特征多肽的特征离子,对龟甲胶、阿胶进行定性鉴别;采用LC-MS MRM法对阿胶特征多肽进行定量分析[1]。刘睿等[15]采用生物质谱法结合蛋白质组学分析寻找鹿皮明胶中的物种特异性肽,并使用靶向质谱法验证特征肽。

    本课题组前期对蜈蚣蛋白质进行分析[16] ......

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