谭倩影,谢贵萍,李响,刘莲芳,吴冠楠,吴晓宇,翟競,

    (1.南京中医药大学第一临床医学院,江苏 南京 210023;2.南京中医药大学附属张家港中医院,江苏 苏州 320582;3.南京中医药大学附属医院/江苏省中医院消化系肿瘤外科,江苏 南京 210029)

    胃癌是起源于胃黏膜上皮细胞的恶性肿瘤,其发生机制主要是在胃黏膜的组织更新和损伤修复过程中,成体细胞出现异常分化[1],机体免疫系统无法正常识别,异形细胞持续增殖分化,形成肿瘤细胞[2]。因此,如何调节机体免疫系统,使其能够识别并抑制肿瘤生长,是目前胃癌治疗的研究焦点。

    大量研究表明,传统中医药在调节机体免疫功能方面具有显著疗效[3-5]。国医大师周仲瑛教授认为“癌毒”核心病机为脏腑功能失调,正气不足、热毒壅塞。正气亏损,癌毒损伤,脾胃运化无权,气血乏源,胃络失养,致瘀毒积聚,终而形成癌瘤。因此,如何扶正固本,培补中土,以胃气为本,使药气四达,周身之机运流通,瘀毒自散,是追本溯源、治本之策。胃癌患者脾胃功能虚弱,运化乏力;胃癌治疗在“扶正固本”的基础上,多强调“益气健脾”。黄芪四君子汤从益气健脾名方四君子汤加用黄芪而来。现代药理学研究进一步表明,黄芪四君子汤主要的靶标蛋白集中于细胞因子(如IL-6、IL-8、IL-1β、EGF)、上皮间质转化(如MAPK1/3/8、MMP9、STAT3、AKT1)、血管新生(如VEGFA、VEGFR)和肿瘤发生发展相关信号通路的关键蛋白(如ERBB2、MYC、JUN)等[6]。我们前期的临床研究也表明,黄芪四君子汤可通过调节细胞因子IL-8的表达从而提高胃癌患者的整体预后[7]。因此,进一步研究黄芪四君子汤对胃癌免疫微环境改变的机制,具有重大意义。

    本研究建立MFC胃癌皮下荷瘤小鼠模型,以黄芪四君子汤灌胃进行干预,通过观察小鼠体质量、肿瘤大小、外周血中常见细胞因子的含量以及肿瘤组织、脾脏组织、胸腺组织中各类T细胞亚群的表达量和肿瘤组织中T细胞内PD1泛素化水平,考察黄芪四君子汤对胃癌组织增殖以及小鼠本身免疫功能的影响,以期为黄芪四君子汤治疗胃恶性肿瘤提供理论依据。

    1 材料

    1.1 实验动物与分组

    C57BL/6小鼠24只,雄性,SPF级,6～8周龄,体质量20～22 g,购于北京斯贝福实验动物公司,生产许可证号:SCXK(京)2014-0006。动物分笼饲养,自由进食、饮水,室温为20～25 ℃,动物适应性饲养1周后用于实验 ......