化湿败毒颗粒治疗呼吸道合胞病毒肺炎模型小鼠的脂质组学研究
磷脂,1材料与方法,1实验材料,2实验动物,3仪器与试剂,4RSV扩增,5动物分组及给药方案,6样本采集,7肺组织病理学分析,8炎症因子及病毒载量检测,9脂质组学样本处理,10UPLC-Q-Exacti
杨斌,汤玉,时晨,单进军(1.南京中医药大学中医儿科学研究所,儿童健康与中医药江苏省高校重点实验室,江苏 南京 210023;2.南京中医药大学医学代谢组学中心,江苏 南京 210023)
呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)属于副黏病毒科肺病毒属,是一种负义单链RNA病毒[1]。RSV感染是诱发小儿肺系疾病的最常见病因之一,通常会引起咳嗽、哮喘、鼻炎等呼吸道疾病,严重者会出现哮喘综合征、呼吸道阻塞、肺不张甚至窒息死亡[2]。临床常用RSV融合蛋白的人单克隆抗体(帕利珠单抗)和利巴韦林预防治疗RSV肺炎,但是帕利珠单抗只可部分预防RSV感染且价格昂贵,利巴韦林副作用多且临床疗效欠佳,所以仍需开发治疗RSV感染的药物,以减少RSV感染对患者的影响[3-4]。
目前传统中药作为新药开发的重要资源,在治疗病毒感染性疾病方面表现出了独特优势。化湿败毒颗粒是黄璐琦院士援鄂抗疫时以《伤寒论》和《金匮要略》为依据,将麻杏石甘汤、藿香正气散等经典名方加减化裁而成的治疗新型冠状病毒感染方剂[5-6],具有化湿解毒,宣肺泻热功效[7]。RSV肺炎与新型冠状病毒肺炎均属疫病范畴,基于中医异病同治的思想探讨化湿败毒颗粒对RSV肺炎的治疗作用目前还未见报道。本研究旨在研究化湿败毒颗粒治疗小鼠RSV肺炎的疗效,并从脂质代谢的角度探讨其潜在的生物学机制。
1 材料与方法
1.1 实验材料
化湿败毒颗粒(生产批号:J2204004;每袋5 g,相当于生药17.13 g)由广东一方制药有限公司提供。RSV A型(Long株)购自中国典型培养物保藏中心。人喉癌上皮细胞 (Human laryngeal epithelial cells,Hep-2)购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心。
1.2 实验动物
SPF级雌性BALB/c健康小鼠,54只,6~8周龄,体质量18~21 g,购于上海市计划生育科学研究所实验动物经营部,实验动物生产许可证号:SCXK(沪)2018-0006,动物实验获得南京中医药大学动物伦理委员会审批通过(伦理批号:202112A033)。实验开展前,将小鼠置于室温为24~26 ℃,相对湿度为52%~56%,12 h光暗昼夜循环的环境中,自由进食饮水进行适应性饲养。
1.3 仪器与试剂
Synergy超纯水系统(美国Millipore公司);Vortex-Genie2涡旋振荡器(美国Scientific industries公司);THZ-C恒温震荡仪(太仓市强乐实验设备有限公司);高速冷冻离心机(美国Beckman公司);Savant SPD1010真空离心浓缩仪(美国Thermo Fisher公司);U3000高效液相色谱仪(美国Dionex公司);Q-Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱仪(美国Thermo Fisher Scientific公司);Xcalibur 2.1SP1数据处理系统(美国Thermo Fisher公司) ......
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