刘明刚，朱 权，孙美珍，孙 洋，李 伟

    外伤性癫痫(post-traumatic epilepsy)是指脑组织从脑外伤开始，经过一定的潜伏期，产生了慢性、复发性、自发性癫痫发作的过程，外伤性癫痫是最适合研究人类癫痫发生机制的模型[1]。癫痫是神经系统常见疾病之一，50%以上病人由各种脑损害引起，即症状性癫痫，而脑外伤后发生癫痫的危险性比正常人高3倍以上，其发生率为4%～53%，占症状性癫痫的首位[2]。外伤性癫痫的发病机制目前尚未完全阐明，最近的临床和动物实验研究表明血-脑屏障(BBB)的破坏在外伤性癫痫的发病机制中起了关键作用[3]。本实验通过自由落体损伤模型分析外伤性大鼠血脑屏障破坏程度与癫痫发作的关系。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物及分组 健康雌雄性各半SD大鼠62只，体重200g～250g，由山西医科大学实验动物中心提供。实验前动物均在实验环境下饲养1周，给予适宜温度(23℃～25℃)和24h光照/暗周期，允许自由饮食。将其随机分为3组：空白对照组10只，不给损伤处理；甘露醇应用组26只，给予头部损伤处理，在头部损伤后24h内，用25%甘露醇注射液1.5g/kg尾静脉注射，每天1次，连续3d，以提高血脑屏障的渗透性；模型对照组26只，给予头部损伤处理，用等体积生理盐水尾静脉注射，在头部损伤后24h内应用，每天应用1次，连续用3d。空白对照组再分为两组分别饲养3d和3个月，每组5只；甘露醇应用组和模型对照组再分别各分为3组，饲养3d和7d各8只，饲养3个月各10只。

    1.2 动物模型的制备 将SD大鼠用10%水合氯醛(3mL/kg)腹腔注射麻醉后，固定于脑立体定位仪上，顶部去毛，消毒，沿正中线切开头皮暴露颅骨，长度约1.5cm，在矢状缝右侧，据前囟0.15cm，矢状缝0.25cm处为中心开骨窗，直径为0.4cm，但不损伤硬膜，然后将大鼠连到自由落体打击装置上，释放重锤，根据吴旭等[4]研究制作成重型颅脑损伤模型。打击后切口内注入40 000U庆大霉素注射液0.5mL预防感染，缝合头皮。空白对照组仅开颅窗不施加打击。

    1.3 方法

    1.3.1 BBB通透性测定 饲养3d和7d的大鼠用于血脑屏障通透性的测定。伊文氏蓝(EB)的渗出量与血脑屏障的开放程度成正相关，应用分光光度计在EB最大吸收光谱635nm处检测脑组织中的EB含量，可以作为判断血脑屏障开放程度的一种定量指标，其脑组织EB含量亦代表血清白蛋白的渗出量[5]7μg/mL、1μg/mL、2μg/mL、4μg/mL、6μg/mL、8 μg/mL、10μg/mL为EB标准浓度 ......