刘云峰，丁亚琴，钟向琴，任乐乐，白 涛，，刘萌萌，章 毅

    电压依赖性钾通道在京尼平苷调控大鼠胰岛素分泌中的作用

    刘云峰1，丁亚琴2，钟向琴2，任乐乐2，白 涛1，2，刘萌萌2，章 毅2

    目的 研究电压依赖性钾(Kv)通道在京尼平苷调控大鼠胰岛素分泌机制中的作用。方法 采用放免法检测大鼠胰岛组织的胰岛素分泌情况，膜片钳技术记录胰岛β细胞Kv电流和动作电位时程(APD)。结果 在8.3 mmol/L葡萄糖条件下，京尼平苷(0～100 μmol/L)可剂量依赖性地增加胰岛素分泌含量，在10 μmol/L时基本达最大促分泌效应，低糖(2.8 mmol/L)情况下则没有作用。膜片钳实验数据表明，京尼平苷剂量依赖性地(0～100 μmol/L)降低Kv通道电流密度，并在10 μmol/L的浓度下发挥最大抑制作用，并明显延长了动作电位时程。结论 京尼平苷在胰岛β细胞中通过抑制Kv、延长APD发挥促胰岛素分泌作用。

    京尼平苷；胰岛素分泌；电压依赖性钾通道；动作电位

    随着人类环境、饮食习惯等变化，糖尿病因其高发病率及高危害性在世界范围内已成为一个日益严重的公共卫生问题。2013年一项流行病学调查显示，中国成人糖尿病患病率已高达11.6%，约1.14亿糖尿病病人[1]，研究能延缓或者治疗糖尿病的药物刻不容缓。临床上使用的促胰岛素分泌剂在长期用药过程中易引发低血糖等不良反应[2]，因此研发具有葡萄糖依赖性的促胰岛素分泌药物对治疗糖尿病有重要意义。京尼平苷(geniposide，GP)又名栀子苷，是一种环烯醚萜类化合物，主要存在于栀子、杜仲等植物中，具有抗炎、保肝[3]、抗糖尿病[4]等作用，近年来因其调节胰岛素分泌作用被大家广泛认识并加以研究。然而，京尼平苷调控胰岛素分泌的机制仍然不明确，因此本课题将采用膜片钳技术对电压依刺性钾(Kv)通道在调控胰岛素分泌中所发挥的作用进行研究。

    1 材料与方法

    1.1 材料及主要仪器 雄性Wistar大鼠(北京动物中心提供)，体重200 g～250 g。胶原酶 P(瑞士Roche)、BSA(加拿大BBI Life Science)、青链霉素(北京索莱宝公司)、Histopaque 1077(美国Sigma公司)、1640培养基(武汉博士德公司)、DispaseⅡ( 美国 Amresco)，大鼠胰岛素放射免疫试剂盒(北京北方生物技术公司)；EPC 10 全自动膜片钳(德国 HEKA)；细胞培养箱(北京博奥恒信生物科技有限公司)；台式离心机(长沙湘仪仪器有限公司)；Narishige MODEL PP830 电极拉制仪、MIROFORGE MF830 抛光仪(日本 Narishige) ......