韦 斌，王 强，姜 浩，朱志华，陈广琴，尹 玮，骆 虹

    ·基础医学论著/研究·

    冠通方对兔心肌缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡形态学的影响

    韦 斌1，王 强1，姜 浩2，朱志华1，陈广琴1，尹 玮1，骆 虹1

    目的 观察冠通方对兔心肌缺血再灌注损伤后心肌细胞凋亡的病理变化，进一步证实冠通方对心肌细胞的保护作用。方法 将48只新西兰大白兔随机分为假手术组、模型对照组、中药对照组、冠通方大剂量组、冠通方中剂量组、冠通方小剂量组，每组各8只。各组分别连续灌胃14 d，制备左室心肌病理切片。比较各组病理切片在光镜下心肌细胞病理形态学结构变化，使用原位末端标记法(TUNEL法)测定各组凋亡细胞指数。结果 冠通方大、中剂量组心肌细胞在光镜下的结构形态得到较好的保护，冠通方大、中剂量组细胞凋亡指数较模型组显著下降(P1 材料与方法

    1.1 动物 48只新西兰大白兔，购自广西医科大学实验动物中心[生产许可证号SCXK(桂)2011-0003]，体质量2.5 kg～3 kg，适应性饲养1周后开始分组。

    1.2 实验药物 冠通方组成：田七45 g，生晒参100 g，丹参150 g，地龙150 g，全瓜蒌150 g，绞股蓝150 g，麦冬150 g，陈皮100 g。由广西中医药大学制药厂按上述配方制成颗粒剂(每包含生药4 g)，分装规格为每包3.5 g。复方丹参滴丸(每粒27 mg)，由天津天士力制药股份有限公司生产(国药准字Z10950111，生产批号101210)。

    1.3 实验试剂及仪器 TUNEL检测细胞凋亡试剂盒为德国Roche公司生产，-20 ℃保存，使用前置于4 ℃溶解混合；DAB显色液试剂盒为北京中杉金桥生物有限公司生产，4 ℃保存，使用前置于室温与稀释液以1∶25稀释混合，现配现用；蛋白酶K溶液为北京中杉金桥生物有限公司生产，-20 ℃保存，使用前置于4 ℃以1∶25稀释，现配现用；磷酸盐缓冲液(PBS)为北京中杉金桥生物有限公司生产，粉剂-4 ℃保存，使用前置于37℃与蒸馏水0.01mol/L稀释，pH为7.2～7.4，现配现用；其余甲醛、酒精、二甲苯等均为国药集团化学试剂有限公司生产，室温避光密封保存。全自动脱水机(德国Leica，ASP300S)，石蜡切片机(德国Leica，RM2245)，奥林巴斯显微镜(日本OLYMPUS，BX53)，病理图文摄像头(日本OLYMPUS，DP73)，小动物呼吸机(北京智鼠多宝生物科技有限公司，DW-3000)。

    1.4 方法

    1.4.1 分组及给药 将48只新西兰大白兔按随机数字表法随机分为6组 ......