梓醇对衰老大鼠血管内皮细胞的保护作用研究
低剂量,主动脉,1材料与方法,2结果,3讨论
,, , ,人口老龄化是当前世界各国所面临的严峻挑战。如何延缓衰老是科学家们不懈探索的重大课题。增龄常伴随着血管结构和功能的改变,是动脉粥样硬化性心血管疾病发生和发展的危险因素之一。血管内皮细胞生物学改变是人类衰老和疾病的基础。近年来,细胞凋亡与衰老关系的研究已成为热点。现有的资料认为细胞凋亡与衰老过程中组织器官功能的退化、衰老相关疾病发生发展密切相关。梓醇(catalpol)是玄参科植物地黄的主要成分,是一种环烯醚萜类葡萄糖苷类化合物。含地黄的中药口服后有抗衰老、降血糖、利尿、强心、抗凝血、提高免疫力、抗肿瘤等作用[1-2]。目前梓醇对神经细胞及脑血管的保护作用有较多的报道[3-6]。而梓醇对衰老血管的保护作用研究相对较少。本研究通过建立D-半乳糖诱导的大鼠衰老模型,应用地黄提取物梓醇对衰老大鼠进行干预,旨在了解梓醇对衰老大鼠的血管内皮细胞的保护作用及相关机制,为临床应用梓醇防治血管老化提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 动物 健康Wester清洁级3月龄雄性大鼠32 只,由山西医科大学实验动物中心提供(清洁级SXCK,2009-0001),体重220 g±20 g。普通饮食适应性喂养1周后备用。
1.2 药品与试剂 梓醇,纯度≥98%,购自南京景竹生物科技有限公司,批号:A2002005;D-半乳糖购自源叶生物科技有限公司,批号:HA0426CA14;细胞凋亡原位检测试剂盒(In Situ Cell Death Detection Kit,POD)购自Roche公司;兔抗鼠Bcl-2、Bax及Caspase-3多克隆抗体均购自基尔顿生物科技(上海)有限公司;SYBR Green PCR试剂盒、逆转录试剂盒及BCA蛋白定量试剂盒为Thermo公司产品;PCR引物由上海捷瑞合成。
1.3 仪器 BIO-RAD公司Mini protean 3 cell型电泳仪,大连竞迈科技有限公司PS-9电转仪,MK3型芬兰雷勃酶标仪,OLYMPUS(CX41)公司正置显微镜,日本JEM1230透视电子显微镜。
1.4 方法
1.4.1 动物模型制备 将32只大鼠随机分为4组,每组8只。即正常组、衰老模型组(模型组)、梓醇低剂量组(低剂量组)、梓醇高剂量组(高剂量组) ......
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