新生大鼠高胆红素血症脑组织Bcl-2表达及干预研究
脑损伤,造模,1材料与方法,2结果,3讨论
,,, , ,, ,高胆红素血症(hyperbilirubinemia)是新生儿期的一种常见疾病,对新生儿影响较大,严重者可因并发胆红素脑病(bilirubin encephalopathy)造成不可逆脑损伤,并遗留多种后遗症,甚至可造成新生儿死亡,给家庭和社会带来沉重负担[1]。因此,阐明新生儿高胆红素血症脑损伤发病机制,为临床诊治新生儿高胆红素血症提供理论依据具有重要意义。关于脑出血、缺血再灌注等颅脑损伤的研究表明,单唾液酸四己糖神经节苷脂(monosialotetrahexosylganglioside,GM1)对多种神经系统损伤具有脑保护作用[2]。但GM1是否对新生儿高胆红素血症脑损伤具有治疗作用,其具体机制目前仍不清楚。本研究目的是观察高胆红素血症时以及应用GM1干预后,新生大鼠脑组织细胞凋亡和Bcl-2表达的情况,以期为新生儿高胆红素血症的诊治提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 实验动物 选择健康的7日龄清洁级SD新生大鼠120只,雌雄不限,体重14 g~18 g,反应良好,购于山西医科大学生理实验室。
1.1.2 主要试剂 晶体胆红素、GM1、兔抗大鼠Bcl-2抗体、SABC免疫组化试剂盒、生物素化羊抗小鼠IgG抗体、DAB显色试剂、乙醚、二甲苯、苯胺蓝、10%多聚甲醛,以上试剂购自博士德生物技术公司太原分公司。
1.2 实验方法
1.2.1 实验动物分组 将120只健康SD大鼠随机分为对照组、模型组、干预组3组,各40只。各组根据造模后动物处死时间不同随机分为6 h组、12 h组、24 h组、48 h组、72 h组5个亚组,每组8只。
1.2.2 注射用胆红素溶液的配制 参考陈舜年等[3]提供的方法配制胆红素溶液,晶体胆红素20.0 mg,避光称取,溶于1 mL氢氧化钠溶液(0.5 mol/L)中,加入双蒸水9 mL,用氯化氢溶液(0.5 mol/L)将pH调节至8.5。
1.2.3 模型制作及干预方法 新生大鼠高胆红素血症模型的制作参照文献[4]方法制备,模型组大鼠腹腔注射胆红素溶液(100 μg/g),对照组大鼠腹腔注射生理盐水(100 μg/g) ......
您现在查看是摘要页,全文长 8570 字符。