， ，雯晴，，

    血管内皮细胞作为血管内的一层屏障，具有活跃的合成细胞因子和各种活性物质，参与机体多种生理功能调节的作用，内皮功能障碍已成为近年来冠心病心肌缺血的重点研究领域。有研究发现，自噬是细胞内长寿命蛋白和胞浆成分降解再循环利用的一种进化保守方式，作为细胞应对损伤的一种保护性反应，对维持细胞内环境稳定及正常生理功能有重要作用[1]。本课题组前期研究发现，微血管内皮细胞(CMECs)在缺血情况下有一定水平的自噬发生，细胞凋亡增加；应用自噬促进剂西罗莫司干预后增强缺血CMECs自噬，减少凋亡；自噬抑制剂3-MA抑制缺血CMECs自噬，进一步增加凋亡。自噬水平变化影响缺血CMECs的结构和功能，推测这种变化会进一步影响缺血心肌的血管生成，中医药能促进缺血心肌血管生成，但基于细胞自噬探讨中药调节血管新生的干预效应鲜见报道。本课题组在前期研究基础上，观察祛风生脉颗粒对大鼠缺血CMECs自噬及血管新生的影响，以明确其干预效应，现报道如下。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 选用SPF级6周龄雄性SD大鼠，体重(220～280)g，40只，由山东鲁抗医药股份有限公司提供。所有大鼠均采用笼养，生存在明暗各12 h饲养环境中。

    1.2 主要仪器 低温高速离心机(美国Thermo Scientific公司)，透射电镜(日本JEOL公司)，CO2培养箱(美国Heraeus公司)，心电图机(北京福田电子医疗仪器有限公司)，呼吸机(美国BIRD公司)，BIO-RAD电泳仪(美国BIO-RAD公司)，Axiovert 40C倒置相差显微镜(德国Zeiss公司)，BIO-RAD半干转膜仪(美国BIO-RAD公司)，LAS-4000型化学发光及荧光影像分析仪(日本FUJIFILM公司)。

    1.3 药品与试剂 祛风生脉颗粒(北京康仁堂药业有限公司)，DMEM高糖培养基(美国Gibco公司)，胎牛血清(浙江天杭生物科技有限公司)，PBS平衡液(上海碧云天生物技术有限公司)，0.25%胰蛋白酶(北京Solarbio公司)，Western-blot所用试剂(北京Solarbio公司)。

    1.4 实验方法

    1.4.1 动物灌胃及血清制备 选取雄性SD大鼠20只，随机分为4组，每组5只。祛风生脉颗粒高剂量组(Q-G组)：3 g/(kg·d)灌胃；祛风生脉颗粒中剂量组(Q-Z组)：2 g/(kg·d)灌胃；祛风生脉颗粒低剂量组(Q-D组)：1 g/(kg·d)灌胃；空白血清组(KX组)：等体积蒸馏水灌胃 ......