黄珍婷杨文明蔡志友

    阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease，AD)是常见的老年期痴呆类型，是一种中枢神经退行性疾病，以进行性的认知功能障碍及不同程度的行为损害为特征。随着人均寿命不断增加与社会老龄化，AD患病率逐渐升高[1]。AD导致的社会和经济问题已引起世界各国和社会的高度重视。AD的主要病理特征是细胞外以β-淀粉样蛋白(β-amyloid peptide，Aβ)沉积形成的神经炎性斑块(镜下可见的老年斑)，细胞内神经原纤维缠结(neurofibrillary tangles，NFT)及神经元丢失[2-5]。AD致病因素复杂，其发病机制有多种假说，存在一个共同点是Aβ积聚。大量研究表明，Aβ积聚可引起机体一系列病理变化，是导致AD发病的重要原因。这是目前被人们普遍接受的AD重要发病机制——Aβ级联假说[6-9]。黄连素又称小檗碱(berberine)，是从黄连、黄柏等植物中提取的异喹啉类生物碱，具有广泛的药理作用。有研究显示，黄连素具有抗炎、抗氧化应激、抑制胆碱酯酶活性、抑制Aβ蛋白聚集和Tau蛋白过度磷酸化等作用，因此其对AD防治具有巨大的潜力[10-15]。本研究探讨黄连素能否减少APP/PS1转基因小鼠脑内Aβ的产生和积聚，改善其认知功能。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂 黄连素(盐酸小檗碱，广东华南药业集团，规格：每粒0.1 g，批号：150904)；生理盐水(四川科伦药业股份有限公司，规格：每袋100 mL，批号：18052902)；Western blot所用 Anti-beta Amyloid 1-42兔单克隆抗体(Abcam公司，批号：GR32357441，稀释浓度1︰1 000)；免疫荧光所用β-Amyloid鼠单克隆抗体(Santa Cruz 公司，批号：10718，稀释浓度1∶100)；Alexa Fluor?488标记山羊抗兔IgG(H+L)(北京中杉金桥生物技术有限公司，批号：134331)、辣根酶标记山羊抗兔IgG(H+L)(北京中杉金桥生物技术有限公司，批号：1326080)；DAPI染色液(碧云天，批号：p0010s)；GAPDH抗体(碧云天，批号：101917180302)；通用二步法检测试剂盒(北京中杉金桥生物技术有限公司，批号：K185910E)。

    1.2 主要仪器 天能化学发光凝胶成像系统(天能5200Multi)；耐可视(Nexcope)科研级生物正置显微镜(耐可视NE900)；水迷宫设备(江苏赛昂斯生物科技有限公司SA201)；电子旋转切片机(赛默飞HM 340E)；自动组织脱水机(浙江省金华市科迪仪器设备有限公司KD-TS3A)；超微量分光光度计(赛默飞ND One)；小型垂直电泳转印系统(Bio-Rad#1658033) ......