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编号:214265
miR-125a-5p抑制剂对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响
http://www.100md.com 2024年4月30日 中西医结合心脑血管病杂志 2020年第8期
组织细胞,货号,心肌细胞,1材料与方法,2结果,3讨论
     心肌缺血再灌注(ischemia and reperfusion,I/R)损伤由Jennings在1960年首次于犬类心脏冠状动脉结扎模型中描述[1]。研究发现血液再灌注后增加心肌坏死速度。心肌I/R损伤导致炎症应答,并对缺血部位多种组织造成进一步损伤,如促进相关组织凋亡等。由心肌缺血导致的急慢性炎症应答对心脏功能退化具有重要影响[2-3]。心肌缺血性心脏病是目前主要的致死性疾病之一[4-5]。及时的血液再灌注是降低死亡率的有效手段,但再灌注本身导致一系列组织损伤和病理异常,如心脏收缩功能降低、心肌细胞代谢异常、内皮细胞功能障碍、坏死和凋亡等[6-7]。引起再灌注损伤的主要因素为一氧化氮(NO)、超氧化物和过氧化亚硝酸盐等产生[7-8]。microRNAs是近年来发现的一类小RNA分子,通过转录后调控基因表达[9]。microRNAs通过调控基因表达影响多种细胞活动和功能,如细胞增殖、凋亡和分化等[10-11]。有研究表明,miR-125a-5p在多发性骨髓瘤细胞中抑制p53通路促进细胞增殖和迁移,并抑制肿瘤细胞凋亡[12]。但针对miR-125a-5p对心肌I/R损伤相关机制报道较少。本研究探讨miR-125a-5p抑制剂对大鼠心肌I/R损伤模型中的影响,以期为心肌I/R损伤疾病提供依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验试剂 苏木素-伊红(HE)染色试剂盒(货号:C0105)均购自碧云天公司。荧光素酶报告基因检测试剂盒(货号:RG005-1)购自碧云天公司。大鼠超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒(货号:QYS-03061)、谷胱甘肽(GSH)检测试剂盒(货号:QYS-231069)和丙二醛(MDA)检测试剂盒(货号:QYS-03052)均购自齐一生物科技(上海)有限公司。白介素-6(IL-6)(货号:ab6672)、Bax(货号:ab53154)、Bcl-2(货号:ab692)、信号传导与活化转录因子3(STAT3)(货号:ab119352)、GAPDH(货号:1056)一抗购自美国abcam公司、辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗小鼠二抗购自美国Santa Cruz公司。SYBR PCR Master Mix(货号:4309155)购自赛默飞公司。

    1.2 实验仪器 半干转膜仪、电泳仪及PCR仪均购于美国伯乐公司;Mμltiskan GO酶标仪购自Thermo;Gel View 6000化学发光凝胶成像仪购于广州云星仪器有限公司。分析天平ME204购自梅特勒托利多国际贸易(上海)有限公司 ......

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