23蔡巧燕23沈阿灵2褚剑锋23彭 军23

    高血压是最为常见的心脑血管疾病，它是威胁人类生命健康的重要疾病之一，也是损害人体重要靶器官如心、脑、肾等的元凶。研究表明，在高血压状态下，脑部会出现不同程度的出血性或缺血性损伤等高血压并发症[1]，在发生损伤时，体内或细胞内自由基和丙二醛等有害化学基团迅速增多，导致线粒体功能障碍，加重细胞兴奋毒性，促进神经元脂质、蛋白质和 DNA过氧化损伤和炎症反应[2]，并进一步造成细胞损伤和坏死以及脑血管病变，最终对大脑皮层造成损伤[1]。因此，抗氧化损伤是防治由高血压引起的脑损伤并发症的重要措施之一。通过抗氧化治疗清除由于脑损伤增多的自由基，并抑制其生成从而减轻活性氧(ROS)在脑内蓄积引起的细胞毒性反应[3]，生成抗氧化物质来防御神经元脂质、DNA和蛋白质造成的氧化损伤，起到保护神经细胞的作用，进而减轻脑组织损伤[4]。p38MAPK/Nrf2/HO-1通路被证实与诸多器官的抗氧化应激损伤有关，该通路的下游产物血红素加氧酶(HO-1)是经典的抗氧化剂酶，具有良好的抑制氧化应激及炎症的作用[5]。

    清达颗粒(QDG)是由陈可冀院士运用几十年的临床经验方清眩降压汤化裁而成，由天麻、钩藤、黄芩、莲子心4味药物组成，具有清肝热、平肝阳、泄心火之功效。有研究表明清达颗粒可有效控制自发性高血压大鼠血压对心、肾等靶器官的损害[6]。而方中单味药的有效成分如天麻素、黄芩苷、异钩藤碱等均可对细胞炎症反应及氧化损伤有一定的抑制功效[7-10]，甲基莲心碱亦对神经细胞有明确的抗氧化应激功效[11]。但是目前对清达颗粒本身潜在的抗氧化应激功效研究尚不充分。本研究拟通过脂多糖(LPS)诱导小鼠脑小胶质细胞株构建细胞炎症反应模型，观察清达颗粒对炎症细胞抗氧化应激的影响，并探究其对p38MAPK/Nrf2/HO-1信号转导通路活化的影响。

    1 材料与方法

    1.1 药物与细胞株 清达颗粒是由天麻12 g、钩藤10 g、黄芩6 g、莲子心5 g配伍制成的颗粒制剂，由江阴天江药业有限公司生产，批号：CKJ2017001；小鼠小胶质细胞株BV-2，购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心。

    1.2 实验试剂 RPIM 1640培养基、胎牛血清、EDTA-0.25%胰蛋白酶、双抗(青-链霉素混合液)，美国Hyclone公司；LPS，美国Sigma公司；MTT粉末，美国Sigma公司；ROS、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)试剂盒，南京建成生物科技有限公司；细胞核蛋白质提取试剂盒 ......