陈 波1，张金盈，马 平

    心肌缺血再灌注(IR)损伤被认为是以自身免疫反应为特征的炎性疾病[1]。核转录因子-κB(NF-κB)超家族核转录因子参与免疫细胞的分化以及多种细胞(包括心肌细胞)的炎症反应[2]。研究表明，NF-κB在急性缺血再灌注损伤期间具有心脏保护作用，延迟激活NF-κB可增强肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)和白细胞介素-6(IL-6)的表达从而诱发慢性炎症[3]。IKK复合物是NF-κB信号通路的中枢调节因子，IKKα是IκB激酶(IKK)复合物的主要成员，研究显示，IKKα对于巨噬细胞表型的活化有显著影响，并且当巨噬细胞缺乏IKK时趋向于分泌促炎因子[4]。因此，探讨IKKα在心肌I/R损伤中的作用以及在心肌IR过程中IKKα对巨噬细胞表型的影响尤为重要。本研究采用IKKα条件性基因敲除小鼠探讨IKKα对缺血再灌注损伤小鼠的保护作用，以及IKKα在心肌I/R损伤后对M1/ M2巨噬细胞的极化作用。

    1 材料与方法

    1.1 药品与试剂 兔抗小鼠诱导型一氧化氮合酶(iNOS，Boster PB0283)、抗表型标记物(Arg1，Bioss bs-0465R)、抗IL-1β(Bioss bs-4947R)等一抗、tublin抗体均购自美国Cayman Chemical公司；抗辣根酶标记山羊抗兔 IgG(生产批号： ZB-2303)购自北京中杉金桥公司；PV-6000免疫组化试剂盒及DAB显色液均购自北京中杉生物技术有限公司。

    1.2 实验仪器 彩色多普勒超声心动图仪(GE Vivid 7，USA)，生理记录仪及RM6280多导生物信号处理系统(浙江医科大学医疗仪器实验厂)；光学显微镜及其成像系统(LEICA DMIRB，Germany)；漩涡混匀器(德国LEICA公司)；Shan-don325 型石蜡切片机(英国Shandon公司)；Genios多功能酶标仪购自瑞士Tecan公司；BIO-RAD电泳、转膜系统购自美国BIO-RAD公司；ChemiDoc TM XRS+凝胶成像仪器购自美国BIO-RAD公司 ......