银杏内酯B对糖尿病大鼠心肌纤维化的抑制作用
低剂量,1材料与方法,2结果,3讨论
高振华,侯书鹏糖尿病心肌病是糖尿病病人常见的慢性并发症,也是导致糖尿病病人死亡的主要原因之一。心肌纤维化是糖尿病心肌病早期组织病理学改变,且呈进行性加重,是导致心脏功能恶化的重要因素,表现为心室舒张和收缩功能障碍,泵血功能降低,逐渐发展为充血性心力衰竭[1]。因此,抑制心肌纤维化是糖尿病心肌病防治的重要靶点。银杏内酯B(ginkgolide B)是银杏叶的主要活性成分之一,具有拮抗血小板活化因子(platelet activating factor,PAF)的作用[2]。相关研究显示,银杏内酯B对肝纤维化及高血压所致心肌纤维化具有明显的抑制作用[3-4],银杏内酯B通过调节转化生长因子-β1(TGF-β1)通路抑制肾小球系膜细胞外基质的分泌[5]。本研究探讨银杏内酯B对糖尿病大鼠心肌纤维化的抑制作用及其机制,现报道如下。
1 材料与方法
1.1 实验动物 50只无特定病原体(SPF)级雄性SD大鼠,6周龄,体重180~220 g,购自河北省实验动物中心[许可证号:SYXK(冀)2018-004],清洁环境分笼饲养,室温23~25℃,相对湿度50%~60%,明暗照射各12 h,适应饲养7 d后开展实验。
1.2 实验药物与试剂 银杏内酯B(纯度>95%)购自上海诗丹德生物技术有限公司;链尿佐菌素(streptozotocin,STZ)购自美国Sigma公司;天冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)试剂盒和苏木精-伊红(HE)、天狼猩红染色试剂盒购自北京索莱宝科技有限公司;TGF-β1、p-Smad2/3、Smad7、β-actin抗体和IgG二抗购自北京博奥森生物科技有限公司;2,2-联喹啉-4,4-二甲酸二钠(BCA)蛋白定量试剂盒,二氨基联苯胺法(DAB)显色试剂盒购自上海碧云天生物技术有限公司。
1.3 实验仪器 OneTouch Ⅱ型血糖仪(美国强生公司);Vevo2100型小动物超声仪(加拿大Visual Sonics公司);LX-20型全自动生化分析仪(美国贝克曼库尔特有限公司);TB718型石蜡包埋机(湖北泰维医疗科技有限公司);RM2245型石蜡切片机(德国Leica公司);DYCZ-40D型电泳槽、DYCZ-24DN型电泳槽(北京六一仪器厂);DS-5M-L1型光学显微镜(日本尼康仪器有限公司) ......
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