孔晓艳，刘纪宁，熊 丽，樊 娇，王 波

    脓毒症是一类高致死性的疾病，最易影响心脏，可引起心脏结构改变，进而引起心力衰竭[1]。心肌损伤也是导致脓毒症病人致死的原因[2]。基于此，寻找早期诊断的治疗方法可改善脓毒症病人的心功能，延长病人的寿命。目前，临床通过一系列的生化标志物诊断早期心肌损伤，如肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme，CK-MB)、肌红蛋白(myoglobin，Mb)和心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin，cTnI)等，但这些生化标志物易受释放机制等因素的影响，在临床早期诊断脓毒症病人心肌损伤中有一定的限制[3]。丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路包括细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular regulated protein kinases-1/2，ERK1/2)和p38，与炎症反应相关，可改善心肌功能损伤[4]。胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白4(cytoplasmic polyadenylation element-binding proteins 4，CPEB4)是胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白家族(CPEBs)中的一员，参与细胞的生长、凋亡和血管生成等生理过程[5]。既往研究显示，CPEB4可能通过ERK1/2和p38通路表达，抑制癌症的生物学行为，但CPEB4基因在脓毒症诱导心肌损伤中的作用机制尚不明确。本研究采用脂多糖(lipopolysaccharides，LPS)诱导脓毒症大鼠凋亡模型，干扰CPEB4表达后，观察大鼠心功能、病理变化、细胞凋亡情况以及对ERK1/2和p38信号通路的影响，为CPEB4作为改善心肌细胞损伤的有效治疗靶点提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 试剂与仪器 CK-MB、cTnI和Mb检测试剂盒均购自上海恒斐生物科技有限公司； 原位末端转移酶标记技术(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling，TUNEL)细胞凋亡检测试剂盒购自德国默克生命科学；LPS购于Sigma-Aldrich公司；shRNA-NC及shRNA-CPEB4载体购于RiboBio公司；Trizol试剂盒、逆转录试剂盒、实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)试剂盒购于南京建成生物工程研究所；CPEB4、p38、ERK1/2、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)和甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)抗体均购于Sigma-Aldrich公司；光学显微镜和低温高速离心机均由本院中心实验室提供 ......