吕 梦，纪晓迪，刘珂珂，娄利霞，聂 波，赵久丽，吴爱明

    心肌梗死后继发的快速型室性心律失常可导致心源性猝死的发生[1]。缝隙连接可作为心肌梗死后心律失常的有效治疗靶点。在心脏中，缝隙连接介导心肌细胞间的电偶联，是维持正常心律、调节血管张力和细胞间代谢交换的基础[2]。缝隙连接蛋白43(CX43)主要在心房和心室肌细胞中表达，是心脏中最丰富的CX亚型[3]。自噬是细胞内受损细胞器和蛋白质降解的保守过程，心肌细胞可以通过自噬降解错误折叠或老化的蛋白质以及细胞器，为心肌细胞提供能量供应从而维持正常的心肌功能，而在心肌梗死病理条件下过度激活的自噬则可引起大量细胞死亡，加重病情进展[4]。研究表明，诱导自噬的条件对连接蛋白的表达水平有直接影响[5-6]。

    稳心颗粒由黄精、三七、党参、琥珀、甘松5味药配伍而成，对于多种原因引起的心律失常有显著疗效。本课题组前期研究发现，稳心颗粒可通过调控CX43的表达分布，从而改善心律失常[7]；而在细胞实验层面，已发现稳心颗粒可调节肥大心肌细胞自噬水平[8]。基于以上线索，本研究通过结扎冠状动脉左前降支，建立心肌梗死大鼠模型，初步探讨心肌梗死后心律失常病理条件下，稳心颗粒对CX43的表达以及心肌自噬水平变化的影响，以此进一步揭示心肌梗死后心律失常的发病机制并阐明稳心颗粒新的干预靶点。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 无特定病原体(SPF)级雄性SD大鼠40只，体质量(200±20)g，购于北京维通利华实验技术有限公司，许可证号：SCXK(京)2016-0006。通过医学伦理审批后，于中医内科学教育部重点实验室屏障环境动物室中饲养。

    1.2 药物及试剂 稳心颗粒，每袋5 g(山东步长制药股份有限公司，国药准字Z10950026)。酒石酸美托洛尔片，每片25 mg(阿斯利康制药有限公司，批准文号H32025391)。自噬相关蛋白微管相关蛋白/轻链3(LC3)、酵母自噬相关基因6哺乳动物同原体(Beclin1) 、P62、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)抗体(Proteintech抗体公司，货号分别为14600-1-AP、11306-1-AP、18420-1-AP、10494-1-AP)，CX43抗体(Abcam公司，货号ab11370)。辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔IgG二抗(兰博利德公司，货号S0101)，免疫组化通用SP试剂盒、3，3-N-二氨基联苯胺四盐酸(DAB)显色试剂盒(中杉金桥公司 ......