杨晓净 肖婷 曹晨 邓向群

    摘要 目的： 探讨微小RNA.200a(miR.200a)对老年糖尿病大鼠心肌的保护作用及机制。 方法： 采用高脂饮食+链脲菌素(STZ)诱导大鼠糖尿病心肌病模型，分为对照组和STZ组。通过注射携带miR.200a腺相关病毒9(AAV9)在心肌内过表达miR.200a，分为对照+AAV9.control组、对照+AAV9.miR.200a组、STZ+AAV9.control组、STZ+AAV9.miR.200a组，每组8只。体外培养大鼠心肌细胞H9c2，分为对照组(5.5 mmol/L葡萄糖培养24 h)、高糖+AAV9.control+si RNA组(转染AAV9.control和si RNA 48 h后用33 mmol/L葡萄糖培养24 h)、高糖+AAV9.control+si核因子E2相关因子2(Nrf2)组(转染AAV9.control和si Nrf2 48 h后使用33 mmol/L葡萄糖培养24 h)、高糖+AAV9.miR.200a+siRNA组(转染AAV9.miR.200a和si RNA 48 h后 用33 mmol/L葡萄糖培养24 h)、 高糖+AAV9.miR.200a +si Nrf 2组(转染AAV9.miR.200a和si Nrf2 48 h后用33 mmol/L葡萄糖培养24 h)。使用酶联免疫吸附法(ELISA)试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、肌酸激酶同工酶(CK.MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)含量；实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测miR.200a表达水平，蛋白免疫印迹法检测相关蛋白表达水平；2′，7′.二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH.DA)染色检测细胞活性氧(ROS)水平；免疫荧光检测Nrf2表达。 结果： 与对照组比较，STZ组心肌组织miR.200a表达下调( P <0.05) ......