利用噬菌体多肽库筛选卵巢癌细胞特异性结合肽(1)

http://www.100md.com 2016年1月1日 中国性科学2016年第1期

     【摘要】目的：利用噬菌体7肽库进行体外快速差减筛选(biopanning and rapid analysis of selective interactive ligands，BRASIL)，从而获得卵巢癌细胞株HO-8910细胞表面特异性结合肽。方法：以中国仓鼠卵巢细胞株CHO为吸附细胞，卵巢癌细胞株HO-8910为靶细胞，利用噬菌体展示技术联合差减筛选策略，经过连续5轮生物淘洗，随机挑选13个噬菌体单克隆进行DNA测序，利用噬菌体竞争结合实验、ELISA实验、细胞免疫染色、细胞免疫荧光、合成多肽的竞争抑制实验鉴定阳性噬菌体的亲和性及特异性。结果：筛选出的噬菌体NPMIRRQ与卵巢癌细胞株HO-8910有较高的亲和性及特异性。结论：阳性噬菌体表面展示的多肽NPMIRRQ可能为卵巢癌的早期诊断和转移复发监测提供新思路。

    【关键词】卵巢癌；噬菌体展示技术；噬菌体多肽库；体外快速差减筛选技术；多肽

    【中图分类号】R737【文献标志码】A

    卵巢癌位于妇科恶性肿瘤死亡之首＼[1＼]。据统计，全球每年卵巢癌的发病率达12.7/100000＼[2＼]。目前，临床上主要通过血清CA-125水平和妇科超声检查来诊断卵巢癌 ......