阚玉娜，谢佳明，简白羽，马立威，陈哲，王文豹，刘吉成*(.黑龙江中医药大学，哈尔滨50040；.齐齐哈尔医学院，黑龙江 齐齐哈尔 6006)

    糖尿病(DM)是一种常见的代谢性疾病，其特征是血糖水平异常升高，这可能会导致多系统并发症，包括糖尿病性酮症酸中毒，肾衰竭，心血管损害甚至死亡。2015年，全世界约有4.15亿人患有糖尿病，到2040年，预计将超过6.4亿[1]，90%为2 型糖尿病(T2DM)[2]。胰岛素抵抗(IR)是T2DM 的主要原因，是指其靶细胞对胰岛素敏感性降低或丧失，导致葡萄糖耐受性降低，动脉高血压，以及葡萄糖和脂质代谢紊乱，最终导致多种并发症，例如非酒精性脂肪肝疾病、心血管疾病和代谢紊乱[3-4]。因此，改善IR已成为治疗T2DM 的主要策略。IR 是推动T2DM发生的重要机制，在生理条件下，胰岛素刺激葡萄糖进入肝脏，骨骼肌和脂肪组织维持葡萄糖稳态，IR 时胰岛素无法激活葡萄糖转运，促进脂质吸收，并抑制脂肪分解。

    磷脂酰肌醇3 激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路是胰岛素信号转导的主要途径，主要调节葡萄糖转运、β细胞存活、胰岛素基因转录等过程，该通路障碍都会导致IR[5]。胰岛素与胰岛素受体(InsR)结合时，胰岛素受体底物(IRS)酪氨酸磷酸化后被激活，随后激活PI3K/AKT 信号通路，参与胰岛素的代谢调节[6]。

    钙敏感受体(CaSR)是不可或缺的膜蛋白，属于G 蛋白偶联受体C 家族。CaSR 可在脂肪组织中表达[7]，CaSR 激动剂使AKT 活性显著增强，其抑制剂可抑制AKT 活性[8]。当CaSR 被激活时，可以使PI3K/Akt 信号通路激活，提示CaSR 与PI3K/Akt 信号通路密切相关[9]。

    1 材料

    1.1 实验动物

    Wistar 雄性大鼠48 只，体质量(200±20)g[黑龙江中医药大学动物实验中心，合格证号编号：SCXK(鲁-2009-0007)]。分笼饲养，房间温度(22±2)℃，相对湿度(50±5)%，空气新鲜，通风良好，按时更换垫料，不限制摄食和饮水。

    1.2 试药

    胆固醇、果糖、蔗糖和谷氨酸钠(上海惠世生化试剂有限公司)；丙硫氧嘧啶(美国Sigma 公司)；Tween 80(天津市进丰化工有限公司)；丙二醇(天津市化学试剂六厂)；葡萄糖(天津基准化学试剂有限公司)；75%乙醇(山东利尔康医疗科技股份有限公司)；苦味酸(西陇化工股份有限公司)；甲醛(天津永晟精细化工有限公司)；二甲苯、无水乙醇、盐酸(北京化工厂)；氨水(西陇科学股份有限公司)；低熔石蜡、高熔石蜡(上海华永石蜡有限公司)；ELISA 试剂盒(南京生物试剂公司)；Trizol Reagen(Invitrogen 公司)；AccuPower RocketScript RT PreMix、AccuPower GreenStar qPCR PreMix 试剂盒(Bioneer 公司)；蛋白裂解液(碧云天生物有限公司)；蛋白预染Marker(美国Thermo 公司)；CaSR、β-actin 抗体(美国Abcam 公司)；AKT、p-AKT(S473)、p-AKT(T308)抗体(美国CST 公司) ......