HPLC-Q-TOF-MS/MS法分析防己茯苓汤的化学成分
分子离子,1材料,1仪器,2试药,2方法,1溶液的配制,2色谱和质谱条件,3结果与分析,1不同制备方法的对比,2成分鉴定,4讨论
刘杨,杨玉佩,沈冰冰2,*(1.湖南省药品检验研究院,长沙 410001;2.湖南省中医药研究院 中药研究所,长沙41001;.湖南中医药大学,长沙 410208)防己茯苓汤是由防己、黄芪、桂枝、茯苓和甘草五味中药组成,来源于《金匮要略》中的水气病脉证篇,具有益气健脾、温阳利水之功效。现代临床主要用于治疗由脾心阳虚湿盛所致之水肿、慢性充血性心力衰竭、尿毒症和系统性红斑狼疮等[1-3];也有在此方基础上进行加减味的复方,用于治疗肾病综合征、乳腺癌、帕金森等疾病[4-5]。但是有关复方防己茯苓汤全成分的化学分析报道较少,因此采用现代中药分析技术手段对其开展化学成分的研究迫在眉睫。其中,HPLC-Q-TOFMS/MS 具有高分辨、高灵敏度等特点,可快速获得目标物的分子离子峰和特征碎片离子,从而对复方中不同类型的化合物进行定性分析[6-7]。本研究首次采用HPLC-Q-TOF-MS/MS 对防己茯苓汤的化学成分进行分析与鉴定,以期为复方的质量控制以及药效物质的深入研究奠定基础。
1 材料
1.1 仪器
Agilent 1290 infinity 超高效液相色谱仪、Agilent 6530 Accurate-Mass Q-TOF-LC-MS/MS 质谱仪(美国安捷伦公司);Mettler Toledo AL204 型电子天平、Mettler Toledo XPE105 型电子天平(梅特勒-托利多仪器有限公司),KM-500DB 型中文液晶台式超声波清洗器(昆山美美超声仪器有限公司)。
1.2 试药
乙腈色谱纯(德国Merck 公司),甲酸[色谱纯,阿拉丁试剂(上海)有限公司],水为纯净水[华润怡宝饮料(中国)有限公司],其余试剂均为分析纯。中药材防己、黄芪、桂枝、茯苓和甘草均购自湖南省自然堂中药饮片有限公司,经湖南省中医药研究院中药研究所助理研究员沈冰冰鉴定为防己科植物粉防己Stephania tetrandraS.Moore 的干燥根,豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao 的干燥根,樟科植物肉桂Cinnamomum cassiaPresl 的干燥嫩枝,多孔菌科真菌茯苓Poria cocos(Schw.)Wolf 的干燥菌核,豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensisFisch.的干燥根。粉防己碱(纯度≥99.6%,批号:110711-201810)、防己诺林碱(纯度≥98.3% ......
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