李楠楠，包永睿，2，3，4，郑义博，王鹤辰，孟宪生，2，3，4*(. 辽宁中医药大学药学院，辽宁 大连6600；2. 辽宁省组分中药工程技术研究中心，辽宁 大连 6600；3. 辽宁省现代中药研究工程实验室，辽宁 大连6600；4. 辽宁中医药大学-安捷伦现代中医药多组学研究合作实验室，辽宁 大连 6600)

    木蝴蝶为紫葳科植物木蝴蝶Orozylum indicum(L.)Vent.的干燥成熟种子，具有清肺利咽，疏肝和胃的功效[1]。黄酮是木蝴蝶的主要成分，具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多种药理作用[2-4]。微流控芯片(microfluidic chip)具有微量化、超高通量化、集成化等优点，广泛应用于生命科学、疾病诊断与治疗、药物筛选等领域[5-7]。本研究应用微流控芯片技术研究木蝴蝶总黄酮类成分在体外对肝癌细胞转移的抑制作用，不仅为木蝴蝶作为抗肝癌药物的研究奠定基础，也为中药抗肿瘤药物的体外药理学研究提供新的方法。

    1 材料

    1.1 仪器

    TG-2U型光刻机(北京中科同志科技有限公司)；LSP04-1A精密注射泵(保定兰格公司)；ECLIPSE-TI 倒置荧光显微镜(日本NIKON 公司)；RT-PCR(Piko Thermol公司)；通用电泳仪(美国BD公司)；直拉单晶抛光硅片(哈尔滨特博科技有限公司)。

    1.2 试药

    木蝴蝶药材购自大连同仁堂药房，经辽宁中医药大学翟延君教授鉴定为Orozylum indicum(L.)Vent.的干燥成熟种子；木蝴蝶总黄酮(由本实验室制备，经紫外分光光度计测定纯度大于90%)。10%胎牛血清、1%青链霉素、DMEM培养基(美国GIBCO公 司)；TRlzol Reagent(美国Life公司)；RIPA裂解液(美国ambion公司)；RT-PCR试剂盒、PMSF蛋白酶抑制剂、磷酸酶抑制剂(北京全式金生物技术有限公司)；SDS-PAGE凝胶快速配置试剂盒、飞克特超敏ECL发光液(大连美仑生物科技有限公司)；抗体Anti-p38 MAPK phosphor(Thr180/Tyr182)(美国Arigo公司)；抗体p38 MAPK、β-actin(美国Proteintech公司) ......