天花粉中瓜氨酸含量的荧光检测
荧光法,1材料,1仪器,2试药,2方法与结果,1对照品溶液的制备,2供试品溶液的制备,3瓜氨酸含量测定,4线性关系考察,5精密度考察,6重复性考察,7加样回收率考察,8不同产地天花粉中瓜氨酸的含量测定,3讨论
陈汇鸿,向玲玲,梁韵诗,伍海婷,黄新安,张静(广州中医药大学青蒿研究中心,广州 510405)天花粉(Trichosanthis Radix)为葫芦科植物栝楼的干燥根,是一种常用的中药。其性味甘、微苦、微寒,具有清热泻火、生津止渴、消肿排脓的作用,常用于治疗热病烦渴、肺热燥咳、疮疡肿毒[1-2]。现代医学研究表明其提取物具有治疗糖尿病、终止妊娠、抗肿瘤、抗病毒等药理作用[3-7]。 瓜氨酸是天花粉的主要特征氨基酸[8],同时也是《中国药典》规定的天花粉定性鉴别的标准。目前,天花粉中瓜氨酸的定量检测主要有以下3种方法:
① 高效液相色谱法[9-10]:该法通常需要将无紫外吸收的氨基酸进行柱前衍生化,然后采用高效液相色谱对瓜氨酸衍生物进行分离和定量分析。最近也有报道采用蒸发光散射检测器,可以直接测定天花粉配方颗粒中的瓜氨酸含量[11]。② 薄层色谱法[12]:该法通过硅胶薄层色谱将瓜氨酸与其他物质分离,然后采用茚三酮试液显色,通过扫描峰面积而得到瓜氨酸含量。③ 紫外分光光度法[13-14]:该法的原理是瓜氨酸选择性与二乙酰肟在强酸(硫酸+磷酸)高温下反应生成有紫外吸收的产物,然后通过测定反应混合液的吸光度而得到瓜氨酸含量。这3种方法都能准确测量天花粉中的瓜氨酸含量,可以为天花粉药材的质量评价提供客观依据,但是目前仍难以实现大规模和高通量的检测。
基于荧光技术具有灵敏度高和便捷快速等优势,我们在前期的工作中,设计合成了一类高选择性的瓜氨酸荧光探针Napdialyne[15]。该化合物本身无荧光,但是在酸性条件下可以与瓜氨酸反应生成高荧光的加成产物。本研究拟使用该荧光探针首次探索天花粉中瓜氨酸含量的荧光测定(检测原理见图1) ......
您现在查看是摘要页,全文长 6349 字符。