Sp1转录因子及凋亡在顺铂所致急性肾损伤中的表达研究(2)
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3 标本收集 所有大鼠注射顺铂前24 h和注射顺铂后24 h收集24 h尿,测尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖甘酶(NAG),注射顺铂后48 h,10%水合氯醛麻醉后摘眼球取血测血清肌酐(Scr)和血尿素氮(BUN),取右肾下极组织做病理检查?
4 病理检查 右肾下极组织采用10%福尔马林固定,石蜡包埋?切片,HE染色,光镜观察?采用图文分析系统拍照,观察肾脏组织病理学改变并根据Capasso等[4]人采用的标准进行评分:肾小管损伤评分:0=没有肾小管损伤;1=肾小管损伤范围<25% ;2=肾小管损伤范围25% - 50%;3=肾小管损伤范围51% -75%?4=肾小管损伤范围>75%?每张病理切片随机选择10个视野评分,取平均值?
5 免疫组化 采用专业图像分析软件Image-Pro Plus 6.0(ipp6.0)进行免疫组化分析?
6 TUNEL检测肾小管上皮细胞凋亡 细胞核中有棕黄色颗粒者为阳性细胞,即凋亡的细胞?每张病理切片随机选择10个视野,共计数100个细胞,计算凋亡细胞百分数,取平均值?
7 统计方法 采用SPSS13.0统计软件包进行资料分析,实验结果用均数±标准差(x±s)表示,资料采用单因素方差分析(ANOVA),多个样本之间的两两比较采用LSD检验,P<0.05认为有统计学意义?
二?结 果
1 各组大鼠血尿生化指标 CP组大鼠与CN组比较 ......
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