应用高效液相色谱法对盐酸胺碘酮个体化给药方案的研究
【摘要】 目的:本文建立了高效液相色谱法(HPLC)测定抗心律失常药物盐酸胺碘酮的血药浓度,并给患者制订个体化给药方案。方法:运用高效液相色谱法对服用盐酸胺碘酮的患者进行血药浓度测定,再根据测定结果调整患者用药剂量,直至达到规定血药浓度范围。结果:我们根据56人共90人次的血药浓度测定结果,共为32人制订了个体化给药方案(包括延长用药时间或改变用法用量),占总检测人数的57.1%,改变后的用药方案使84.4%患者达到了有效的血药浓度范围。结论:HPLC 法测定盐酸胺碘酮的血药浓度简便、快速、准确,可用于盐酸胺碘酮的临床检测。通过测定服用这两种药物的患者的血药浓度以及服用剂量的分析,可见要使患者达到有效治疗浓度范围,必须给予不同的服药方法和剂量,才能使患者药物治疗安全有效。
【关键词】 高效液相;盐酸胺碘酮;个体化给药方案;研究
盐酸胺碘酮(amiodarone)又名乙胺碘呋酮,可达龙,属Ⅲ类抗心律失常药,用于室上性和室性心律失常,可有效地将心房扑动、心房颤动和室上性心动过速转变为窦性心律。长期口服应用,其消除半衰期长达19-40d[1],有效血药浓度为1-2.5 mg/L,中毒血药浓度为1.8-3.7 mg/L[2],长期服用对生物个体有不良反应,且治疗血药浓度范围较窄[3,4],所以在临床需进行血药浓度监测。
, http://www.100md.com
一、 资料来源
1. 基本资料:2009年3月-2010年2月,职工总医院门诊、临床科室共接诊口
服盐酸胺碘酮片的心律失常患者56人,平均年龄49.9岁,进行盐酸胺碘酮血药浓度监测90人次。
2. 血样采集:抽取受试者清晨空腹静脉血3ml。
二、实验方法
1 材料与方法
1.1 仪器
美国安捷伦G1311A HPLC泵、G1322A脱气机、G1316A柱温箱、G1314B紫外检测器、JHDR型水浴锅(江苏金坛市中大仪器厂)、WH-566型混合器(姜堰市新康医疗器械有限公司)、PAS-25C型精密酸度计(上海理达仪器厂)、PA2004型电子天平(上海越平科学仪器有限公司)、12孔高速离心机(科大创新股份有限公司中佳分公司)。
, 百拇医药
1.2 试剂
胺碘酮对照品(中国药品生物制品检定所)、甲醇(天津市科密欧化学试剂有限公司)、冰乙酸(天津市富宇精细化工有限公司)、三乙胺(国药集团化学试剂有限公司)、二乙胺(莱阳市化工实验厂)、乙醚(江苏三木集团公司化工厂)、乙腈(天津市光复精细化工研究所)、磷酸氢二钾(天津市科密欧化学试剂有限公司)、磷酸二氢钾(天津市科密欧化学试剂有限公司),以上试剂均为色谱纯或分析纯,水为去离子重蒸水。盐酸胺碘酮片(0.2g×24粒)(海南制药厂有限公司制药一厂)。
1.3 色谱条件
色谱柱:Agilent HC-C18(2) 4.6*150mm 5 m;流动相:甲醇-水-三乙胺(90:10:0.2,PH= 5.5)流速:1 ml/min;检测波长λ=242 nm。标准色谱图见图1和图2:
1.4 标准溶液配制
, 百拇医药
取胺碘酮对照品适量于容量瓶中,用甲醇溶解并稀释成约1mg/ml的标准储备液,备用。
1.5胺碘酮血样处理方法
取临床血样离心5min(3000r/ml) ,得空白血浆,再取空白血浆分别制成碘,酮标准血浆液配0.3、0.5、1.0、3.0、4.0g/ml,取血浆0.5ml,加PH=5.8的磷酸缓冲液0.5ml,涡旋1min,混匀,加乙醚3ml,涡旋5min ,离心10 min(3000r/ml),取醚层到另一离心管,在原离心管再加3ml乙醚,涡旋3min,离心10 min(3000r/ml),取醚层,两次合并,45℃水浴N2挥干,200l甲醇溶解,取50l进样。
三、实验结果
1.标准曲线的绘制[5]
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取5支10 mL带盖一次性塑料试管依次加入约0.5ml空白血浆,再加入不同毫升的胺碘酮标准液,使血浆药物浓度相当于0.3、0.5、1.0、3.0、4.0g/ml,按1.5项下操作,进行HPLC分析。以胺碘酮浓度为纵坐标,峰面积为横坐标,进行线性回归。
结果表明:盐酸胺碘酮在0.3g/ml- 4g/ml范围内线性关系良好,回归方程为:y=0.0618x+0.15,r=0.9994。
2.精密度试验
分别制备0.3、2、4g/ml 3个浓度的胺碘酮标准血浆液,按1.5项下操作,当日分别进样5次,计算日内RSD。结果见表1:
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四、讨论
1.我们应用HPLC法对盐酸胺碘酮进行血药浓度监测的方法测试共进行了21次,其中,流动相用甲醇-水-二乙胺(86:14:0.2,PH= 5.5),进样量20l,共测试8次,终因此方法未能有效地检测出盐酸胺碘酮的含量而失败。后把流动相改为乙腈-水-三乙胺(90:10:0.2,PH= 5.5),进样量50l,可检测出盐酸胺碘酮的含量,但是考虑到乙腈[3]等为流动相价格昂贵、不利于环境保护而放弃,最后将流动相改为甲醇-水-三乙胺(90:10:0.2,PH= 5.5),进样量50l,可有效、稳定、快速而准确地检测出盐酸胺碘酮的含量,且前处理简单,适用于胺碘酮血药浓度的临床监测。方将盐酸胺碘酮血药浓度监测方法定位前述方法。
2. 在我院进行盐酸胺碘酮血药浓度监测的有56人,共检测90人次。其中有24人初次检测即达到治疗浓度范围。其他32人初次检测均未达到有效血药浓度,调整药量后服药十多天后重新进行检测,有25人血药浓度合格,另外7人调整用量后有5人未进行检测,另外两人血药浓度仍未合格,再次调整用量后检测方合格。盐酸胺碘酮用法用量和有效率见表2:
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3.由此证实了,盐酸胺碘酮的个体差异较大,用法用量虽然不同但最终均能达到治疗有效浓度,但是,建议口服该药的患者需用药15天甚至更长时间达到稳态血药浓度后,再进行用药效果的评估。而该药的清除半衰期大约为50～60d,少数人长达3～4个月,而5个半衰期的时间将更长。所以临床应用时,当胺碘酮的维持剂量消减或药物停服后一段时期,心律失常没有发作时,不能过早地断言“心律失常已被根治”,或“该维持量十分恰当”,因为药物此时还可能处于缓慢的排泄过程中。因此,要定期进行血药浓度监测。
【参考文献】
[1]徐叔云主编.临床药理学[M],第2版.北京:人民卫生出版社,2002: 236.
[2]国家药典委员会编. 2000年版二部临床用药须知[M],第3版.北京:化学工业出版社, 2001: 214.
[3]李发美.医药高效液相色谱技术[M].北京:人民卫生出版社,1999.464-465.
[4]罗会盛、张宏文.反相高效液相色谱法测定血浆中胺碘酮的含量[J].药学进展,2002,20(3):166.
[5]刘世明.血清中胺碘酮浓度的测定[J].中国临床药学杂志,2004,13(6):353., 百拇医药(王妙菊 张红怡 张海生 赵宏庆 王 宁)
【关键词】 高效液相;盐酸胺碘酮;个体化给药方案;研究
盐酸胺碘酮(amiodarone)又名乙胺碘呋酮,可达龙,属Ⅲ类抗心律失常药,用于室上性和室性心律失常,可有效地将心房扑动、心房颤动和室上性心动过速转变为窦性心律。长期口服应用,其消除半衰期长达19-40d[1],有效血药浓度为1-2.5 mg/L,中毒血药浓度为1.8-3.7 mg/L[2],长期服用对生物个体有不良反应,且治疗血药浓度范围较窄[3,4],所以在临床需进行血药浓度监测。
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一、 资料来源
1. 基本资料:2009年3月-2010年2月,职工总医院门诊、临床科室共接诊口
服盐酸胺碘酮片的心律失常患者56人,平均年龄49.9岁,进行盐酸胺碘酮血药浓度监测90人次。
2. 血样采集:抽取受试者清晨空腹静脉血3ml。
二、实验方法
1 材料与方法
1.1 仪器
美国安捷伦G1311A HPLC泵、G1322A脱气机、G1316A柱温箱、G1314B紫外检测器、JHDR型水浴锅(江苏金坛市中大仪器厂)、WH-566型混合器(姜堰市新康医疗器械有限公司)、PAS-25C型精密酸度计(上海理达仪器厂)、PA2004型电子天平(上海越平科学仪器有限公司)、12孔高速离心机(科大创新股份有限公司中佳分公司)。
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1.2 试剂
胺碘酮对照品(中国药品生物制品检定所)、甲醇(天津市科密欧化学试剂有限公司)、冰乙酸(天津市富宇精细化工有限公司)、三乙胺(国药集团化学试剂有限公司)、二乙胺(莱阳市化工实验厂)、乙醚(江苏三木集团公司化工厂)、乙腈(天津市光复精细化工研究所)、磷酸氢二钾(天津市科密欧化学试剂有限公司)、磷酸二氢钾(天津市科密欧化学试剂有限公司),以上试剂均为色谱纯或分析纯,水为去离子重蒸水。盐酸胺碘酮片(0.2g×24粒)(海南制药厂有限公司制药一厂)。
1.3 色谱条件
色谱柱:Agilent HC-C18(2) 4.6*150mm 5 m;流动相:甲醇-水-三乙胺(90:10:0.2,PH= 5.5)流速:1 ml/min;检测波长λ=242 nm。标准色谱图见图1和图2:
1.4 标准溶液配制
, 百拇医药
取胺碘酮对照品适量于容量瓶中,用甲醇溶解并稀释成约1mg/ml的标准储备液,备用。
1.5胺碘酮血样处理方法
取临床血样离心5min(3000r/ml) ,得空白血浆,再取空白血浆分别制成碘,酮标准血浆液配0.3、0.5、1.0、3.0、4.0g/ml,取血浆0.5ml,加PH=5.8的磷酸缓冲液0.5ml,涡旋1min,混匀,加乙醚3ml,涡旋5min ,离心10 min(3000r/ml),取醚层到另一离心管,在原离心管再加3ml乙醚,涡旋3min,离心10 min(3000r/ml),取醚层,两次合并,45℃水浴N2挥干,200l甲醇溶解,取50l进样。
三、实验结果
1.标准曲线的绘制[5]
, 百拇医药
取5支10 mL带盖一次性塑料试管依次加入约0.5ml空白血浆,再加入不同毫升的胺碘酮标准液,使血浆药物浓度相当于0.3、0.5、1.0、3.0、4.0g/ml,按1.5项下操作,进行HPLC分析。以胺碘酮浓度为纵坐标,峰面积为横坐标,进行线性回归。
结果表明:盐酸胺碘酮在0.3g/ml- 4g/ml范围内线性关系良好,回归方程为:y=0.0618x+0.15,r=0.9994。
2.精密度试验
分别制备0.3、2、4g/ml 3个浓度的胺碘酮标准血浆液,按1.5项下操作,当日分别进样5次,计算日内RSD。结果见表1:
, http://www.100md.com
四、讨论
1.我们应用HPLC法对盐酸胺碘酮进行血药浓度监测的方法测试共进行了21次,其中,流动相用甲醇-水-二乙胺(86:14:0.2,PH= 5.5),进样量20l,共测试8次,终因此方法未能有效地检测出盐酸胺碘酮的含量而失败。后把流动相改为乙腈-水-三乙胺(90:10:0.2,PH= 5.5),进样量50l,可检测出盐酸胺碘酮的含量,但是考虑到乙腈[3]等为流动相价格昂贵、不利于环境保护而放弃,最后将流动相改为甲醇-水-三乙胺(90:10:0.2,PH= 5.5),进样量50l,可有效、稳定、快速而准确地检测出盐酸胺碘酮的含量,且前处理简单,适用于胺碘酮血药浓度的临床监测。方将盐酸胺碘酮血药浓度监测方法定位前述方法。
2. 在我院进行盐酸胺碘酮血药浓度监测的有56人,共检测90人次。其中有24人初次检测即达到治疗浓度范围。其他32人初次检测均未达到有效血药浓度,调整药量后服药十多天后重新进行检测,有25人血药浓度合格,另外7人调整用量后有5人未进行检测,另外两人血药浓度仍未合格,再次调整用量后检测方合格。盐酸胺碘酮用法用量和有效率见表2:
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3.由此证实了,盐酸胺碘酮的个体差异较大,用法用量虽然不同但最终均能达到治疗有效浓度,但是,建议口服该药的患者需用药15天甚至更长时间达到稳态血药浓度后,再进行用药效果的评估。而该药的清除半衰期大约为50～60d,少数人长达3～4个月,而5个半衰期的时间将更长。所以临床应用时,当胺碘酮的维持剂量消减或药物停服后一段时期,心律失常没有发作时,不能过早地断言“心律失常已被根治”,或“该维持量十分恰当”,因为药物此时还可能处于缓慢的排泄过程中。因此,要定期进行血药浓度监测。
【参考文献】
[1]徐叔云主编.临床药理学[M],第2版.北京:人民卫生出版社,2002: 236.
[2]国家药典委员会编. 2000年版二部临床用药须知[M],第3版.北京:化学工业出版社, 2001: 214.
[3]李发美.医药高效液相色谱技术[M].北京:人民卫生出版社,1999.464-465.
[4]罗会盛、张宏文.反相高效液相色谱法测定血浆中胺碘酮的含量[J].药学进展,2002,20(3):166.
[5]刘世明.血清中胺碘酮浓度的测定[J].中国临床药学杂志,2004,13(6):353., 百拇医药(王妙菊 张红怡 张海生 赵宏庆 王 宁)