阴道粘膜上白色念珠菌的鉴别方法

http://www.100md.com 2011年6月1日 《健康必读·中旬刊》 20116

     白色念珠菌又称白色假丝酵母，是一种条件致病菌。通常存在于正常人的口腔、上呼吸道、肠道及阴道粘膜上，当机体免疫功能或一般防御能力降低或正常寄存的微生物间相互制约作用失调，就容易引起念珠菌病。处于生长繁殖期的霉菌孢子，因具有葡聚糖-甘露聚糖甲壳质结构完整的细胞壁，经革兰染色第三步乙醇脱色后，以磷钼酸封闭细胞结构，使霉菌孢子胞浆内吸入的结晶紫保留，胞浆部分被染成紫黑色，而具有甲壳质成分的细胞壁被染成甲基绿色。此着色特点与不完整的霉菌孢子和其他细胞成分形成鲜明对比。据此，我们设计了下列白色念珠菌的鉴别方法，简介如下。

    1试剂

    1.1第一液取结晶紫乙醇饱和液(2g结晶紫溶于95%乙醇20ml内)20ml，加10g/l草醇铵水溶液80ml混匀。第二液：碘1g、碘化钾2g加少许蒸馏水，充分振摇溶解后加蒸馏水至300ml。第三液：95%乙醇或乙醇：丙酮(7：3)混合液。

    1.210g/l磷钼酸液称取磷钼酸1g加50ml蒸馏水，待完全溶解后加蒸馏水至100ml。

    1.310g/l甲绿溶液，称取提纯的甲绿1g加60-80℃蒸馏水50ml，使其溶解后用蒸馏水补足至100ml。

    2方法

    2.1已固定的涂片：滴加第一液1min，水洗；滴加第二液冲去残水，媒染1min，水洗，将片上的残水甩掉，再用95%乙醇(第三液)脱色。

    2.2将玻片浸入10g/l磷钼酸液体作用5min，水洗。

    2.3再滴加10g/l甲绿溶液30-60s水洗，干后，以1000倍油镜检查。

    3结果判断

    3.1生长繁殖期酵母样霉菌孢子，因具有完整细胞壁，故细胞浆被染成深紫黑色，细胞壁为绿色。

    3.2破碎霉菌孢子，其胞浆脱出仅余细胞壁呈绿色，仅存在于胞浆或破损后细胞浆逸于周围者呈淡紫色或无色。

    3.3胞浆内质体如线粒体可呈黑色。

    3.4其它细胞成分呈现绿色。, 百拇医药(李 军)

    百拇医药网 http://www.100md.com/html/paper/1672-3783C/2011/06/243.htm