抗中性粒细胞胞浆抗体的实验室检测
[摘要] 抗中性粒细胞胞浆抗体是一种以中性粒细胞和单核细胞胞浆成分为靶抗原的自身抗体。对系统性血管炎、炎症性肠病等多种疾病的诊断与鉴别具有重要意义。已成为自身免疫性疾病的一项非常重要的常规检测项目。检测ANCA的方法有多种，如：间接免疫荧光发、ELISA、免疫印迹法、欧蒙斑点法、欧蒙印迹法等。
[关键词] 抗中性粒细胞胞浆抗体；IIF检测方法；cANCA；pANCA
抗中性粒细胞抗体(ANCA)是指与中性粒细胞及单核细胞胞浆中溶酶体酶发生反应的抗体。当中性粒细胞受抗原刺激后，胞浆中的α-颗粒释放蛋白酶-3、髓过氧化物酶物质及白细胞抗原生成，刺激机体而产生ANCA。
一般临床常规检测时，以ANCA(I I F)作为筛查实验，ELISA作为特异性抗体的确认实验，联合检测应用价值更高。I I F是检测ANCA的参考方法或标准方法。至今是检测ANCA的最常用的经典方法。I I F是区分cANCA和pANCA的基础。有较高的敏感性。
, 百拇医药
乙醇固定的人中性粒细胞是间接免疫荧光法检测ANCA的基本基质，可区分出两种不同的荧光模型：一种是均匀分布在整个中性粒细胞胞浆中的颗粒型荧光，细胞核无荧光(cANCA：胞浆型)，其主要的靶抗原为位于中性粒细胞嗜苯胺蓝颗粒中的蛋白酶3，这种荧光模型在甲醛固定的中性粒细胞与乙醇固定的中性粒细胞中表现相同。cANCA：抗原主要是蛋白酶-3(PR3-proteinase)。cANCA主要见于韦格纳肉芽肿(阳性率占80%，且与病程、严重性和活动性有关)。系Wegener(WG)肉芽肿病的特异性抗体。C-ANCA对呼吸道有亲合性，致上下呼吸道坏死，肉芽肿形成。C-ANCA阳性也可见于少数显微镜下多动脉炎(MPA)、Churg-Strauss综合征(CSS)、结节性多动脉炎(PAN)、少数巨细胞动脉炎、过敏性紫癜、白细胞破碎性皮肤性血管炎和白塞病。
另一种是围绕中性粒细胞细胞核的平滑带状荧光(pANCA：核周型)，可由多种特异性特异性的抗体引起，目前发现的靶抗原有髓过氧化物酶、粒细胞特异性弹性蛋白酶、乳铁蛋白、溶菌酶。抗BPI抗体既可引起cANCA的荧光模型。pANCA：抗原主要为髓过氧化物酶(MPO)。pANCA不如cANCA具有诊断特异性。pANC阳性主要见于特发性坏死性新月体性肾小球肾炎(NCGN)、 显微镜下多动脉炎(MPA)。也可见于Churg-Strauss综合征(CSS)、结节性多动脉炎(PAN)、SLE、RA、SS、SSc。在NCGN、MPA中pANCA和cANCA阳性率几乎相同。相对而言，pANCA患者的血管炎病变程度重，常有多系统损害。
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也可引起pANCA的荧光模型，抗MPO抗体通常引起pANCA的荧光模型，但在一些特殊情况下也可引起cANCA的荧光模型。另外，抗MPO抗体产生的pANCA还可以与甲醛固定的中性粒细胞反应，产生的荧光模型与乙醇固定的粒细胞中出现的cANCA类似(这种类型的pANCA又叫甲醛固定的pANCA)，而其它靶抗原引起的pANCA一般不与甲醛固定的中性粒细胞反应(这种类型的pANCA又叫甲醛抗性的pANCA)。因而根据乙醇和甲醛固定的中性粒细胞的表现，可初步判断ANCA的靶抗原：PR3、MPO及非MPO。
ANCA靶抗原特异性抗体检测
IIF测定的是总ANCA，不能准确地区分靶抗原，需要单特异的检测方法作为补充。目前，ANCA的确认实验有多种，如ELISA和各种印迹技术。一般建议临床用ELISA做确认实验，因为ELISA能定量检测，而抗PR3和MPO抗体的水平与疾病的活动度相关，常作为原发性血管炎判断疗效、估计复发、指导临床治疗的重要指标。
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随着临床对ANCA认识的普遍提高，ANCA已成为重要的常规检测项目。检测ANCA应注意避免：1)仅用IIF检测ANCA，而不做确认实验(如抗PR3和MPO抗体的检测)，而降低了ANCA对疾病诊断的特异性(尤其是原发性小血管炎)；2)仅检测抗PR3和MPO两种特异性抗体，而不检测IIF-ANCA，限制了ANCA对疾病诊断的应用范围(如对慢性炎症性肠病和自身免疫性肝病等)；3)用IIF检测ANCA时，仅用乙醇固定的粒细胞作为检测基质，不能严格排除ANA的干扰，容易出现假阳性结果。
参考文献：
[1] 蔡细英，梁寅艳.抗中性粒细胞胞浆抗体检测的探讨.现代中西医结合杂志.2010，34.
[2]张西峰. 抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)的临床意义是. 医学科普，2010，04., 百拇医药(陈琳 杜国梅)
[关键词] 抗中性粒细胞胞浆抗体；IIF检测方法；cANCA；pANCA
抗中性粒细胞抗体(ANCA)是指与中性粒细胞及单核细胞胞浆中溶酶体酶发生反应的抗体。当中性粒细胞受抗原刺激后，胞浆中的α-颗粒释放蛋白酶-3、髓过氧化物酶物质及白细胞抗原生成，刺激机体而产生ANCA。
一般临床常规检测时，以ANCA(I I F)作为筛查实验，ELISA作为特异性抗体的确认实验，联合检测应用价值更高。I I F是检测ANCA的参考方法或标准方法。至今是检测ANCA的最常用的经典方法。I I F是区分cANCA和pANCA的基础。有较高的敏感性。
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乙醇固定的人中性粒细胞是间接免疫荧光法检测ANCA的基本基质，可区分出两种不同的荧光模型：一种是均匀分布在整个中性粒细胞胞浆中的颗粒型荧光，细胞核无荧光(cANCA：胞浆型)，其主要的靶抗原为位于中性粒细胞嗜苯胺蓝颗粒中的蛋白酶3，这种荧光模型在甲醛固定的中性粒细胞与乙醇固定的中性粒细胞中表现相同。cANCA：抗原主要是蛋白酶-3(PR3-proteinase)。cANCA主要见于韦格纳肉芽肿(阳性率占80%，且与病程、严重性和活动性有关)。系Wegener(WG)肉芽肿病的特异性抗体。C-ANCA对呼吸道有亲合性，致上下呼吸道坏死，肉芽肿形成。C-ANCA阳性也可见于少数显微镜下多动脉炎(MPA)、Churg-Strauss综合征(CSS)、结节性多动脉炎(PAN)、少数巨细胞动脉炎、过敏性紫癜、白细胞破碎性皮肤性血管炎和白塞病。
另一种是围绕中性粒细胞细胞核的平滑带状荧光(pANCA：核周型)，可由多种特异性特异性的抗体引起，目前发现的靶抗原有髓过氧化物酶、粒细胞特异性弹性蛋白酶、乳铁蛋白、溶菌酶。抗BPI抗体既可引起cANCA的荧光模型。pANCA：抗原主要为髓过氧化物酶(MPO)。pANCA不如cANCA具有诊断特异性。pANC阳性主要见于特发性坏死性新月体性肾小球肾炎(NCGN)、 显微镜下多动脉炎(MPA)。也可见于Churg-Strauss综合征(CSS)、结节性多动脉炎(PAN)、SLE、RA、SS、SSc。在NCGN、MPA中pANCA和cANCA阳性率几乎相同。相对而言，pANCA患者的血管炎病变程度重，常有多系统损害。
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也可引起pANCA的荧光模型，抗MPO抗体通常引起pANCA的荧光模型，但在一些特殊情况下也可引起cANCA的荧光模型。另外，抗MPO抗体产生的pANCA还可以与甲醛固定的中性粒细胞反应，产生的荧光模型与乙醇固定的粒细胞中出现的cANCA类似(这种类型的pANCA又叫甲醛固定的pANCA)，而其它靶抗原引起的pANCA一般不与甲醛固定的中性粒细胞反应(这种类型的pANCA又叫甲醛抗性的pANCA)。因而根据乙醇和甲醛固定的中性粒细胞的表现，可初步判断ANCA的靶抗原：PR3、MPO及非MPO。
ANCA靶抗原特异性抗体检测
IIF测定的是总ANCA，不能准确地区分靶抗原，需要单特异的检测方法作为补充。目前，ANCA的确认实验有多种，如ELISA和各种印迹技术。一般建议临床用ELISA做确认实验，因为ELISA能定量检测，而抗PR3和MPO抗体的水平与疾病的活动度相关，常作为原发性血管炎判断疗效、估计复发、指导临床治疗的重要指标。
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随着临床对ANCA认识的普遍提高，ANCA已成为重要的常规检测项目。检测ANCA应注意避免：1)仅用IIF检测ANCA，而不做确认实验(如抗PR3和MPO抗体的检测)，而降低了ANCA对疾病诊断的特异性(尤其是原发性小血管炎)；2)仅检测抗PR3和MPO两种特异性抗体，而不检测IIF-ANCA，限制了ANCA对疾病诊断的应用范围(如对慢性炎症性肠病和自身免疫性肝病等)；3)用IIF检测ANCA时，仅用乙醇固定的粒细胞作为检测基质，不能严格排除ANA的干扰，容易出现假阳性结果。
参考文献：
[1] 蔡细英，梁寅艳.抗中性粒细胞胞浆抗体检测的探讨.现代中西医结合杂志.2010，34.
[2]张西峰. 抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)的临床意义是. 医学科普，2010，04., 百拇医药(陈琳 杜国梅)