人神经营养素-3基因修饰的神经干细胞(1)
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[摘要] 目的：探讨移植表达人神经营养素-3(human neurotrophin-3，hNT-3)基因的神经干细胞(neural stem cells， NSCs)对缺血性脑损伤大鼠海马区内源性NSCs的增殖、分化的影响。方法：建立大鼠缺血再灌注脑损伤模型，在术后第7天将转染hNT3基因的神经干细胞(NSCs- hNT3)，移植到大鼠纹状体半暗带。对照组移植普通NSCs或生理盐水。然后腹腔注射BrdU对新增殖的细胞进行标记，再行免疫荧光双标染色对NSCs的增殖及分化进行检测。结果：与对照组比较，NSCs-hNT3移植后，能显著增加大鼠缺血侧海马齿状回(denate gyrus， DG)BrdU+细胞数(P=0.037，P=0.004， respectively)，其中90%以上为BrdU与DCX染色双阳性(BrdU+/DCX+)的未成熟神经元。且与生理盐水组比较，普通NSCs移植后，缺血侧海马DG区BrdU+/DCX+细胞数也显著增加(P=0.004)。结论：NSCs移植对大鼠缺血侧海马DG区内源性NSCs增殖有促进作用，新增殖的细胞主要向神经元方向分化；经hNT-3基因修饰， NSCs的治疗作用得以加强，并有助于神经功能的改善。
[关键词] 神经干细胞；慢病毒载体；转基因；神经营养素-3；脑缺血
应用干细胞移植技术来治疗中风等神经系统疾病的基础研究已取得一定进展。但到目前为止，还没有直接证据表明移植细胞能和宿主的神经网络建立有功能的突触联系[1]。近年来，研究方向已转向促进中枢神经系统(central nervous system， CNS)内源性NSCs的增殖、存活及向神经元方向分化[1]。本研究旨在进一步探讨细胞移植后对大鼠海马区内源性细胞增殖及向神经元方向的分化的影响。
1材料和方法
1.1 实验动物及器械
孕14天Sprague-Dawley大鼠1只及雄性Sprague-Dawley大鼠(体重230g～250g)由汕头大学医院实验动物中心提供 ......
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