敲低IncRNA`-CCAT1表达对胶质瘤细胞凋亡影响(2)
1材料和方法1.1细胞系及试剂和仪器
人脑胶质瘤U251细胞系购自中国科学院上海细胞库。RPMI 1640培养液、FBS均购自美国Gibco;IncRNA`-CCAT1`-阴性对照(NC)和IncRNA`-CCAT1`-小干扰RNA(siRNA)均由广州瑞博生物科技有限公司合成;噻唑蓝(MTT)试剂盒及DMSO均购自美国Sigma;β`-catenin、cyclinD1和Survivin抗体及HRP标记的二抗均购自美国Abcam;细胞凋亡试剂盒、流式细胞仪均购自美国BD;多功能酶标仪购自美国Bio`-Rad;实时荧光定量PCR(qRT`-PCR)试剂盒购自大连TaKaRa。
1.2细胞培养
U251细胞常规复苏后,使用含体积分数0.10 FBS的RPMI 1640培养液,在体积分数0.05 CO2、37 ℃恒温培养箱中培养,每天观察细胞生长状态,每2 d换液1次 ......
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