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编号:13488721
柠檬酸铁胺对SH-SY5Y细胞中葡萄糖脑苷脂酶活性及其蛋白表达的影响(2)
http://www.100md.com 2020年4月1日 《青岛大学学报(医学版)》 20202
     1.1 实验材料

    SH-SY5Y细胞系由中国科学院上海细胞库提供,DMEM高糖基础培养液、胎牛血清(FBS)购自以色列BI公司,4-甲基伞形酮-β-葡萄糖苷(4-MU-β-GLC)、CBE、FAC和GCase一抗购自美国Sigma公司,β-actin抗体、HRP-IgG标记的二抗购自北京博奥森公司,ECL发光液为Millipore公司产品,其他试剂均为国产分析纯。

    1.2 SH-SY5Y细胞的培养

    实验前将实验器具高压灭菌。从液氮中取出冻存的SH-SY5Y细胞转移到37 ℃水浴中迅速(30 s内)解冻,充分摇匀后置于离心机中,以1 000 r/min离心5 min,弃去上清,加入完全培养液吹打均匀后接种到25 cm2细胞培养瓶中,光镜下观察细胞是否贴壁,然后置于培养箱中(37 ℃、含体积分数0.05 CO2)培养,每隔2 d传代1次。

    1.3 实验分组及处理

    将SH-SY5Y细胞分为对照组(A组)、FAC处理组(B组)、CBE处理组(C组)、FAC和CBE共处理组(D组)。将SH-SY5Y细胞以2×104/cm2的密度接种于6孔板中,每孔加入1.5 mL的细胞混悬液 ......
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