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编号:11544887
鹿茸Ⅰ型胶原的提取及在细胞培养中的应用
http://www.100md.com 2007年3月1日 《医药月刊》 2007年第3期
     [摘要] 采用醇提法从鹿茸中分离得到Ⅰ型胶原,应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和氨基酸含量测定对其进行鉴定。用分离得到的鹿茸Ⅰ型胶原包被培养板,将Vero细胞、L929细胞及Hela细胞分别接种在已包被和未包被的培养板上,MTT法检测细胞生长情况。结果表明,鹿茸Ⅰ型胶原明显能够改善细胞的贴壁和增殖。

    关键词:鹿茸 I型胶原 细胞培养

    中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:1672-5085(2007)3-0140-03

    鹿茸作为临床治疗药物,在我国的应用有几千年的历史。研究表明,鹿茸中含有大量的I型胶原[1]。胶原是蛋白质的一种,是哺乳动物体内含量最多的一类蛋白质,是天然存在的具有很高利用价值的生物物质[2]。尤其对细胞的固定附着及改善生长表面的特性有很好的作用,因此,近年来胶原被广泛应用于各种细胞的分离和培养[3 4]。本文以鹿茸为原料,制备Ⅰ型胶原并对其在细胞培养中的应用进行了初步研究。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 鹿茸鲜鹿茸由吉林东丰药业提供。

    1.1.2 细胞系非洲绿猴肾细胞Vero及人宫颈癌细胞Hela为长春生物制品研究所惠赠;小鼠成纤维细胞L929为东北师范大学惠赠。

    1.1.3 试剂高分子量标准蛋白为Amersham Biosciences UK公司产品;DMEM培养液、小牛血清为Gibco产品;胰蛋白酶(活力1:250)、MTT(噻唑蓝)购自Sigma公司;其他化学试剂均为国产分析纯。

    1.1.4 实验仪器高速组织捣碎机DS-1,上海标本模型厂;台式低速大容量离心机TDL-5,上海安亭科学仪器厂;冷冻干燥机LL3000 ......

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