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编号:1477830
SIRT6在原发性肝癌中的表达变化与抑瘤机制分析△
http://www.100md.com 2016年8月9日 北方药学 2016年第8期
孔板,孵育,1材料与方法,2SIRT6发挥肝癌抑瘤作用机制实验研究,3统计学方法,4结果,5讨论
     刘妙娜刘琢冰郑 娟谢 星吴伟刚(.深圳市第三人民医院 深圳 582;2.广东医学院附属深圳第三人民医院 深圳 582;3.赣南医学院 赣州 34000)

    ·实验研究·

    SIRT6在原发性肝癌中的表达变化与抑瘤机制分析△

    刘妙娜1刘琢冰2郑娟2谢星3吴伟刚(11.深圳市第三人民医院深圳518112;2.广东医学院附属深圳第三人民医院深圳518112;3.赣南医学院赣州341000)

    SIRT6是Sirtuin家族的组成部分,是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)依赖的组蛋白去乙酰化酶。SIRT6是肝脏葡萄稳态主调节者,通过对胰岛素/IGF1样信号(IIS)途径的影响,基于多个网络调控机制,实现对葡萄糖代谢的影响,对人体生命维系和控制肿瘤产生作用。本文笔者以SIRT6为出发点,分析其在原发性肝癌中的表达变化与抑瘤机制。

    SIRT6原发性肝癌 表达变化 抑瘤机制

    1材料与方法

    1.1材料与试剂:TUNEL(试剂盒)、蛋白酶/磷酸酶抑制剂、活化型半胱天冬酶-3抗体、ERK1/2抗体、总ERK1/2抗体、U0126、ECL试剂盒、二氯氢化荧光素(DCF)、4%多聚甲醛、0.3%过氧化氢液、BCA蛋白浓度测定试剂盒、总蛋白提取试剂盒等。

    1.2细胞株和质粒载体:一方面,通过已构建好的Ad-SIRT6真核质粒载体和Ad-SIRT6-shRNA质粒载体进行试验。另一方面,HepG2细胞为细胞株,在联合Ad-SIRT6-HepG2与Ad-GFP-HepG2细胞的基础上,进行培养繁殖。

    2 SIRT6发挥肝癌抑瘤作用机制实验研究

    2.1分析TUNEL:(1)将无菌平板片放置于96孔板中,清洗干净,利用多聚赖氨酸覆盖浸润后倒除,达到固定细胞的效果。(2)待平板片干后 ......

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